干扰素诱导的跨膜蛋白(IFITMs 1, 2和3）是一类重要的先天免疫效应因子，能够阻止脊椎动物的多种病毒感染。然而，这些小膜蛋白的细胞内机制和活细胞成像在病毒侵入哺乳动物细胞过程中一直不清楚。为了研究IFITMs在哺乳动物细胞中的抗病毒机制及其与病毒的相互作用，作者通过CRISPR-Cas9基因编辑建立了人源IFITM1、IFITM2、IFITM3突变细胞系，并建立了IFITM3位点特异性荧光标记，用于病毒感染过程中的活细胞成像。
作者发现IFITM1、IFITM2和IFITM3在干扰素刺激的细胞中协同作用，对抗各种病毒(IAV、VSV、DENV、WNV和ZIKV)，并促进内源性(激活的EGFR)和外源性(病毒颗粒)在晚期内吞小泡中向溶酶体转运降解。通过活细胞IFITM3成像实验，作者发现病毒囊泡与IFITM3阳性囊泡融合后，主要与宿主膜发生脂质混合或半融合。病毒颗粒和IFITM3-阳性囊泡的预融合共定位对限制病毒(IAV和EBOV) 是特异性的，并且loss-of-function的IFITM3突变体会使得这种预融合共定位显著地减少。
实验还证明了Cys72位点特异性的s-fat -酰基化对于IFITM3转运进入IAV颗粒非常重要。综上所述，IFITM3能够与携带进入的病毒颗粒的囊泡结合，促进晚期内吞物进入溶酶体进行降解，这强调了IFITMs拦截病原体并阻止其进入宿主细胞的普世机制。
这篇文章的另一大两点在于介绍的位点特异性蛋白标记和活细胞成像方法可以促进病原菌限制宿主因素及其调控机制的功能分析。
文章链接：https://www.nature.com/articles/s41589-018-0213-2
作者：ZX
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