快意谈“编辑”,煮酒论“剪刀”
众所周知,基因编辑的世界,曾是TALEN、ZFN和CRISPR/Cas三足鼎立,可如今CRISPR越来越红火,竟隐约有几分独占鳌头的感觉。
可同样是基因编辑技术,TALENs和ZFN这两个江湖前辈,怎么就比不过CRISPR这个后起之秀呢?究竟三者之间谁才真正更胜一筹呢?
在本期《文献精读》课程中,解螺旋翡翠老师F&G分享了关于基因编辑的系列文章,聚焦于该领域里主流的编辑技术,详细讲解各种技术的原理、操作方法、实例应用分析以及优缺点,可让该领域的逐浪者按需选择相应技术。
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作为研究基因体内实验的利器,基因敲除小鼠对于科研人员来说自然不是一个陌生的领域,这其中就涉及到了基因编辑技术领域中最为经典的技术Cre-loxP系统。
因而,课程中则先是详细介绍了Cre-loxP系统的原理,如Cre重组酶和loxp序列的概念与特点、以及Cre重组酶介导loxp序列重组的三种情况。
随后,课程也逐步拆解该技术的具体操作方法,从而实现全身编辑小鼠和条件编辑小鼠的获取。
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其实,在CRISPR成为基因编辑领域的王者之前,是锌指核酸酶(ZFN)和转录激活因子样效应子(TALEN)这两类新型的编辑技术,掀起一浪又一浪的基因编辑高潮,是科研界里当之无愧的“香饽饽”。
因而,课程中则详细介绍了ZFN和TALEN技术的实验原理,随后以TALEN技术为例,细述了该技术实行的操作方法。
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CRISPR之所以能风靡全球,是因为它来源于细菌抵御病毒侵染的天然免疫系统,是来自生物学的真正礼物。与其它基因组编辑工具相比,它更易于操作,具有更强的可扩展性。
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课程中对以上4种基因编辑技术的优缺点进行了全面的比较,为基因功能研究提供了一份实用指南,可以让该领域的科研者,依据各自研究目的和需要,简单直观的找到最适合自己的技术。
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科研领域中,新兴技术在不断的涌现,尤其是基于CRISPR系统(CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas13系统)衍生的RNA编辑技术,也在日新月异的发展着,这也为日后的生物学研究提供了越来越大的助力。
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