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半夏块茎中分离的三种新生物碱

      半夏(Rhizoma Pinelliae)为天南星科(Araceae)半夏属植物半夏(Pinellia Pedatisecta Schott)的干燥块茎。具有镇咳、祛痰、止吐以及镇静催眠等作用。始载于《礼记·月令》:“五月半夏生,盖当夏之半,故为名也”。《神农本草经》称之为“地文”、“水玉”,宋《图经本草》记载:“二月生苗茎,顶端出三叶,浅绿色,颇似竹叶而光,江南似芍药叶。根下相重,上大下小,皮黄肉白”。

      半夏包含众多的化学成分,包括生物碱、甾醇类、氨基酸、挥发油、芳香族成分、黄酮类等,而生物碱被认为是半夏药理作用的主要有效成分之一。

图为生物碱结构

      由于其外观与天南星相似,因此在将两者用作治疗各种疾病时存在着混淆。为了区分这两种植物并确定其活性成分,四川理工大学化学工程学院的Du Jing于我刊2018年16期发表了题为“Three new alkaloids isolated from the stem tuber of Pinellia pedatisecta”的文章,对半夏的块茎的化学成分进行了研究。

      在研究中,作者通过各种色谱技术分离和纯化化学成分,并根据理化性质和光谱数据鉴定其结构,获得了三种新的生物碱。

      化合物1为白色粉末。分子式C12H12N6O由HR-ESI-MS(m/z 257.115 4[M+H]+,Calcd)确定。13C NMR给出了12个信号,包括10个芳香碳,1个甲氧基和1亚甲基碳,结合10度的不饱和度,推断化合物1与花生素A具有相同的骨架化合物1比后者多一个甲基信号。在分析了HSQC和HMBC谱后,从3.79(-OCH3)到155.23(C-4’)的相关性表明甲氧基连接到骨架的吡啶环上。表明甲氧基与C-4‘相连。因此,化合物1被确定为9-((5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-9H-嘌呤-6-胺。结构如下:

      化合物2被分离为白色无定形粉末。HR-ESI-MS峰位于m/z 284.089 1[M+Na]+(Calcd.  m/z 284.089 9)表明其分子式为C14H15NO4,不饱和度为8度。在δH7.03(2H,d,J=8.0 Hz),6.76(2H,d,J=8.0 Hz)处的两个额外的二重态表明存在具有两对等价的邻位偶联质子的对称酚醛衍生物,表明是对取代苯。13C NMR谱在δC 176.9和169.2处显示羰基信号。还检测到芳香碳的信号。化合物2的NMR谱类似于1-(4-羟基苯乙基)吡咯烷-2,5-二酮,但其多出来一个额外的乙酰基。这些结果表明化合物2是1-(4-羟基苯乙基)吡咯烷-2,5-二酮的乙酰化产物。化合物2的化学结构通过其与NaOH溶液(1%)在甲醇水溶液中的反应得到脱乙酰化产物1-(4-羟基苯乙基)吡咯烷-2,5-二酮。因此,化合物2被确定为4-(2-(2,5-二氧吡咯烷素-1-基)乙酯)苯乙酸酯。结构如下:

      化合物3被分离为白色无定形粉末。HR-ESI-MS峰位于m/z 321.107 2[M+Na]+(m/z 321.107 6)表明其分子式为C14H14N6O2。1H NMR谱表示其含有一个甲氧基和一个乙酰基。13C NMR中给出14个信号,包括10个芳香碳,一个甲氧基碳和一个乙酰碳。比较化合物3和化合物1的1H NMR和13C NMR数据,除了化合物3存在一个额外的乙酰基外,它们非常相似。因此推断,化合物3是化合物1的乙酰化衍生物。为了进一步确认化合物3的化学结构,将化合物1在100℃下与Ac2O/Et3N反应得到乙酰化产物3。证明化合物3就是化合物1的乙酰化衍生物,结构如下:


      作者将Hela细胞培养在含有10%胎牛血清(GIBCO)的RPMI-1640(GIBCO)培养基中,在5%CO2和37°C条件下。以阿霉素为阳性对照,采用MTT法评估对HeLa细胞的细胞毒性。结果表明,化合物1和3在HeLa细胞中表现出良好的抗增殖活性,IC50值分别为3.02±0.54和7.16±0.6 2μmol·L-1,而化合物2具有中等活性,IC50为35.6 6±6.2 4μmol·L-1。实验结果证明,半夏中的部分生物碱可能与半夏的抗肿瘤活性有关。

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