“她用尽全身力气敲了两下他的脖子，然后拿走了他的头颅。”（犹大书13：8）这是圣经故事中一个引人注目的情节：朱迪斯和赫罗弗尼斯。这个故事讲述了美索不达米亚王国的尼布甲尼撒二世如何派遣他的将军赫罗弗尼斯征服中东地区。 他还想让他的军队占领彼都利亚城。居民即将投降，此时，美丽的以色列寡妇朱迪斯准备去解救他们。她和她的女仆巡视了敌军营地，在那里找到了赫罗弗尼斯将军的帐篷。赫罗弗尼斯被朱迪斯的美貌所诱惑，企图勾引朱迪斯。但是正如前面描述的，朱迪斯把他灌醉并杀死他。
年轻漂亮的女子冒着自己的生命冒险，甚至准备为了人民的利益而杀戮，这类主题常年受到艺术家的追捧。 文艺复兴时期许多的艺术家选择斩首的主题。米开朗基罗决定采用更传统的解读方式。在这里，我们看到赫罗弗尼斯被杀后，朱迪斯和她的女仆趁人不备，悄悄地离开了营地。
米开朗基罗讲述这个故事时，没有让我们观画者与主角有目光的交流。朱迪斯背对着我们，她仆人的脸被抬起的手臂遮去了一半。 图中左边的守卫正在睡觉，无头的赫罗弗尼斯则躺在黑暗之中。
朱迪斯这一强大的女性人物，其实是圣母玛利亚的预示。她也与对面的画中胜利的大卫一样，象征着信仰战胜了邪恶，而这种信仰也体现在教堂之中。
如果我们观察一下赫罗弗尼斯的头颅，能发现他与米开朗基罗的外貌有诸多相似之处。这确实就是这位艺术家的肖像。米开朗基罗的目的是表达出绘制西斯廷教堂的壁画使他付出了巨大的牺牲。他反复多次地把这个任务称为殉难。他在1509年给父亲的信中写道：“我受到很大的折磨，生活条件非常艰苦，我没有朋友也不想有朋友”。艰巨的生活条件，照明状况不良和对赞助人的不耐烦使得本就十分辛劳的工作变得更加艰辛。
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