在毒理试验中,常常收集4h、24小时或某特定时间内的尿液。通过采尿进行尿常规检查、样品尿中代谢浓度的测定等。为此常用代谢笼配上粪尿分离漏斗收集尿液,此装置除支架外均用玻璃或有机玻璃制成,便于清洗。该装置主要包括圆形有机玻璃笼罩,带孔的圆玻璃底盘,供饮水和食料的装置,锥形集尿漏斗和粪尿分离器等。动物置于代谢笼内,粪尿分离漏斗的侧口接一只150~200ml的集尿容器收集尿液。一般5~6小时内,平均每只小鼠可收集到0.4~0.5ml的尿液。
1 可采尿情况
1.1 按照试验方案中规定的方法、频度以及时间进行采尿。SD或兽医根据试验判断有必要进行尿检查的场合时,可以临时采尿。
1.2 对试验大、小鼠的采尿,利用动物代谢笼进行。
1.3 检查用尿以4 h之内收集的尿或24 h收集的尿进行。
1.4 如果试验方案中规定了尿检查的项目,就按照试验方案中的规定的项目进行检查。尿检查一般项目包括:浊度、颜色、尿胆素原、隐血、胆红素、酮体、葡萄糖、蛋白质、PH、亚硝酸盐,尿沉渣(通常新鲜尿)、尿中电解质等。
1.5 在试验开始前由SD或兽医以试验方案的形式向病理临检部门提出检查要求。
1.6 在试验方案中没有要求进行尿测定,但是SD或兽医根据试验判断有必要进行尿测定的情况下,同尿临检检查负责人协商,并对试验方案进行修变更。
2 采尿程序
2.1 按照试验方案对采尿的动物数、动物号、采尿时间(新鲜尿、24 h尿)等进行确认。
2.2 提前将动物代谢笼洗干净并消毒后运进动物饲养室,将饮水瓶、饲料盒、尿收集瓶(管)等都准备好,可根据收集时间的长短决定是否需要在尿收集过程中给动物禁食或供给饲料。一般的,短时间(如4~8 h)的尿收集可以给动物禁食,但不禁水。
2.3 按照试验方案中规定的时间将标记标签(记录试验编号、动物号等)的集尿瓶接于动物代谢笼的嘴端,固定。
2.4 如果收集尿液时发现有必要再次采集,按再次采集(4项)操作。
3 采尿的记录
在尿采集记录表格上记载采集的尿量、浊度、颜色等,记录采集时间,并署名。
4 再次采集
4.1 为了进行尿检查,出现以下情况时需进行再一次收集尿:
4.1.1 尿量异常的多,怀疑时由于饮水瓶漏水所致。
4.1.2 尿中有呕吐物、下痢便、血便等异物混入,或者有其它怀疑的情况。但是,由于给药造成的频繁呕吐、流涎等,此种不可避免有异物混入的情况下,记录主要情况,没有必要再次采尿。
4.1.3 需要新鲜尿进行检查,而当日没有收集到新鲜尿的场合。
4.1.4 进行尿检查,由于操作上的失误或者有困难不能完成测定的场合。
4.1.5 经临检承担者,专题负责人或兽医判断有必要确认试验再现性时。
4.2 对于前边4.1.1~4.1.4项情况下,应尽可能早地开始再次采尿。
4.3 对于4.1.5的场合时,再次采尿判断者,检验承担者以及采尿承担者联络后,确认实验动物号,再次采尿的时间、日期,在试验方案记载允许的时间内完成。
4.4尿检查的记录表格、用于检查的新鲜尿、尿量、电解质测定等数据很多,因此再次测定的理由、数值的采用、以及不采用的理由、年月日等以及判断者均进行署名记录,在再采尿的记录表格上进行记录,对于每一个数值的采用或者不采用分别记录。
5 收集尿液的注意点
5.1 尿液收集器必须保证粪尿分开,防止粪便污染尿液。标本容器务须洁净,其容量视动物而定。
5.2 标本收集后,须在新鲜时进行检验,若需放置时间较久,则须贮放在冰箱或加入适当的防腐剂。
5.3 分析尿中金属离子时,代谢笼等应避免用金属材料制成,集尿容器最好用聚乙烯材料的。
5.4 为了满足实验所需尿量,在收集尿液前,可灌喂适量的水及青菜。
6 尿检查
尿常规检查项目一般包括:浊度、颜色、尿胆素原、隐血、胆红素、酮体、葡萄糖、蛋白质、PH、亚硝酸盐,尿沉渣(通常新鲜尿)、尿中电解质等。
6.1 尿常规检查的准备
6.1.1 新鲜尿的场合(4 h尿)
6.1.1.1 尿量至少要达到1.0 ml。但4 h收集的尿量未能达到,又想得到尿时,重新收集4 h新鲜尿,如果10 h仍然未收集到足够尿的话,则第二天重新收集。
6.1.1.2 把采集得到的尿,1500 rpm离心5 min。离心后,把上清液转移到新的离心管,标上动物号码,作为常规检查试验用。沉渣部分作为尿沉渣检查用。
6.1.2 24 h尿
6.1.2.1 把收集到尿充分混合后,装入已经灭菌的标有动物号码的塑料试管中(通常为10 ml的离心管),并且在记录表格上记录采尿量、色度、浊度等。
6.1.2.2 把采集得到的尿,1500 rpm离心5 min。离心后,把上清液转移到新的离心管,标上动物号码,作为试验用标本。
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