病理组织学切片采取与固定

一、病理材料采取

由于各种疾病的病变部位不同，故须根据不同病例在不同部位采取组织。如疑有狂犬病时应切取大脑的海马角、小脑和延脑；疑有栓塞致死时，须检查脑、心室和肾等器官；有马传染性贫血可疑时要切取肝、脾、心、肾和淋巴结等器官；如方向不明时则宜多方面取材料。

要选择正常与病灶交界处的组织块，其中应包括该器官的重要构造，如具有被膜的器官(如肝、肾和脾)至少有一块带有被膜。切取组织块的厚度以2～4 mm为宜，最厚不应超过1 cm，面积不小于1.5～3 cm²，以使之能迅速彻底固定。

二、病理材料固定

1．固定的方法

由于固定的目的是在于尽量使组织和细胞保持与生活时相仿的成分和形态，固定的组织愈新鲜愈好，否则易使组织原有构造消失，影响观察。在切取组织时，宜用锋利的刀、剪，并且要求轻轻使用镊子，不宜过于用力，以免挫伤或压挤组织，勿使组织的构造受到损伤和影响。组织块的大小一般约以1.5 cm×1.5 cm×0.2 cm为宜。固定组织时，应使用足量的固定液，固定液量一般不少于组织总体积的4倍。

对于某些需要制作神经染色和酶反应等的组织固定，要求比一般严格。组织的大小、固定的时间、温度的适当都应慎重考虑。

固定的容器不宜过小，防止组织与容器粘贴，以避免固定不良现象的发生。组织块固定时切忌弯曲扭转，薄片组织块(如肠、胃、膀胱和胆囊等)可先平放于硬纸片上，然后慢慢放入固定液中。组织块不能使之直接接触容器的壁和底，可用脱脂棉或纱布垫于底和壁上，或用纱布将各部材料分别包上，包内放入标签，标签要用铅笔书写，然后浸入固定液中。

在固定容器表面贴上标签，标明标本名称和编号。

2．固定剂和固定液

(1)乙醇  80％酒精固定数小时，然后再换95％酒精固定。

(2)甲醛  市售甲醛为40％甲醛水溶剂。一般作为固定使用的甲醛溶液浓度为4％。

(3)重铬酸钾  重铬酸钾以其0.5％的水溶液作为固定用。

(4)醋酸  又称冰醋酸，固定常用5％溶液。

(5)苦味酸  苦味酸通常固定的浓度是饱和液。

(6)升汞  一般固定用饱和水溶液。

(7)各种复合型固定液复合型固定液固定效果更好，主要的复合型固定液有Zenker氏液、Helly氏液、Muller氏液、Bouin氏液和Carnoy氏液。