一、单肺移植
1．犬左肺异体原位移植模型
(1)切取供体肺：胸骨正中切开，上腔静脉、下腔静脉及横窦分别套带：切下左肺组织一块做病理检查；于主肺动脉前壁做一荷包缝合，插入内径3mm灌注导管；于左心耳注入肝素(3mg／kg)；分别结扎上腔静脉及下腔静脉，阻断横窦，切开左心耳，经肺总动脉灌注管注入前列腺素E1 0.5mg及Euro-Collins液(60ml／kg，加入肝素1mg／kg，4℃～6℃)，胸腔内加入4℃～6℃盐水，6～7min灌注完毕。于肺膨胀50％时，钳夹隆突上气管，尽可能保留较长的气管，将切下心肺放入4℃～6℃盐水中(加入肝素1mg／kg)保存。修剪左侧肺，保留与左肺静脉各支相连的左房袖，较长的左肺总动脉及适当长的左总支气管，待做肺移植用。
(2)切除受体左肺：基本同第2阶段自体肺移植切除左肺方法，但受体内要保留与左房相连左肺静脉各支、较长的左肺总动脉及左总支气管，与供肺做吻合。切除左肺后手术野彻底止血。
(3)植入肺：肝素(1mg／kg)注入受体犬的左心耳后，将经热缺血3～5min及冷却血110～220min的供体肺左房袖、左肺总动脉及左总支气管分别与受体肺的左房袖、左肺总动脉及左总支气管做吻合，用3-0或4-0线连续缝合左房袖、左肺总动脉及左总支气管的膜部，间断套入缝合总支气管的软骨部，将供体左总支气管套入受体左总支气管内。缝合过程中于左胸内放入4℃～6℃盐水保护供肺。
2．模拟无心跳犬左肺自体移植模型
用3％的戊巴比妥钠(30mg／kg)麻醉后将犬呈右侧斜位固定于手术台上，呼吸机维持通气：吸入氧浓度(FiO2)1.0，潮气量10ml／kg，呼吸频率20／min，吸气与呼气比为1：2，呼气末正压(PEEP)为0.49kPa(5cmH2O)；游离右侧股动、静脉，用压力传感器分别监测体循环压力和中心静脉(CVP)；穿刺左侧股静脉，维持静脉输液[4ml／(kg·h)]。将M1190A型动脉血氧饱和度(SaO2)传感器套于犬舌末端，监测SaO2。经第5肋间左前外侧切口入胸，纵行剪开心包，游离左肺动脉干，预置阻断线。于主肺动脉干根部置肺动脉测压管，监测平均肺动脉压(MPAP)，置左心房测压管1根监测左心房压(LAP)；给予肝素3mg／kg，肝素化后用血管钳夹闭左肺动脉，膨肺5min，维持气管压力<2.94kPa(30cmH2O)，排除左肺残血。用无创钳阻断左主支气管及左肺动、静脉，使左肺处于萎缩状态，同时将潮气量减少1／3；热缺血lh后将左肺置入一双层塑料袋中，放入小冰块和冷盐水，保持冷缺血温度稳定于0℃～4℃。冷缺血3h后，去除冷盐水及塑料袋，依次开放左肺静脉、左主支气管和左肺动脉，使左肺充分膨胀；20min后，阻断右肺动脉、右主支气管及右肺静脉。粗丝线疏松关闭胸腔，同时给予鱼精蛋白(3mg／kg)。
二、心脏移植
1．犬心脏原位移植
(1)供心手术：快速胸部正中切开，剪开胸骨，静脉注射肝素3mg／kg，切开心包，显露大血管和心脏，结扎上腔静脉、下腔静脉，钳闭主动脉，在主动脉根部灌注含钾冷心脏停搏液，剪开下腔经脉和右上肺静脉。在上腔静脉入右心房处以上切断上腔静脉，心包内切断下腔静脉。从下腔静脉口剪开右心房，直达右心耳根部，不要伤及窦房结。抬起心脏，从左、右肺静脉开口处切下左心房，使左心房后壁成为四方形口，保留左心房侧壁和房间隔。从无名动脉起始处切断主动脉，在肺动脉分叉处切断主肺动脉。供心被完全切除下来后，移送至受心手术台。
(2)受心手术：解剖左侧股动静脉，插入中心静脉测压管，经股动脉扎入动脉测压管。连接心电图电极，以监测心律、心率。行胸正中切口，剪开胸骨，缝扎止血。切开心包，向四周悬吊心包切缘。分离上腔静脉，环绕阻断带，膈肌下分离出下腔静脉，环绕阻断带，静脉注入肝素3mg／kg。经升主动脉插入动脉供血管，尽量靠近上方。经右心房下侧壁插入下腔静脉引流管，经右心房上外侧壁插入上腔静脉引流管，经房间沟捅入左心房引流管。修剪供心的同时，体外循环开始，血流降温，鼻咽温度28℃～30℃时，阻断上、下腔静脉，钳闭主动脉。沿右房室沟处切开右心房，切口向上、下延伸，上方切除右心耳，下方抵达冠状静脉窦开口处。将心脏翻转向右侧，显露左心房，沿房室沟切开左房壁，上方达左心耳根部，并将左心耳一并切除。下方切口延伸至右心房切口并与之相连，沿左、右心房交界处切开房间隔，再切除左心房顶部房壁。在肺动脉瓣环稍上方横向切断肺动脉，在主动脉瓣环稍上方横向切断主动脉，至此，受体的心脏被切除。左心房处呈一方形口，口内含有4根肺静脉的开口。左心房吻合在受体的左肺上静脉的前缘、右肺下静脉下缘，房间隔的上、下缘各缝一牵引线，使整个左心房四缘显示非常清楚，可以看到全部肺静脉的开口。将相对应的2根牵引线牵起，边缘呈直线，与供心的对应缘吻合，非常方便而且确实。用5-0号线先吻合外缘，依次吻合下缘、内缘和上缘，最后吻合房间隔，左心房吻合完毕。右心房吻合从供心下腔静脉切开的切缘与受体心脏右房下方近下腔静脉处作为对应部位，用5-0号线将供心右房右切缘与受心左房间隔吻合，即房间隔被缝合两次。供心右房切口与受体右心房切口相缝合。主、肺动脉吻合用4-0缝线，在主动脉腔内吻合，从后缘开始缝至主动脉右侧壁时，缝针由主动脉内穿出主动脉壁到腔外，再做连续缝合，完成主动脉吻合。肺动脉吻合的缝合方法与升主动脉吻合相同。
2．大鼠同种异位心肺联合移植
供体心肺取出：麻醉后将大鼠固定于手术板上，经腹正中线切开腹腔，用自动拉钩拉开腹壁，充分暴露腹腔。于腹壁静脉注射肝素(3mg／kg)，待全身肝素化后，剪开胸前皮层至颌下做较大范围分离，然后再剪断腹主动脉，迅速沿双侧腋前线打开胸腔至锁骨剪开心包，将碎冰块覆盖在心脏上，于下腔静脉向心脏注射4℃肝素／平衡液1～2ml，然后再注射4℃ St Thomas液2ml，依靠心脏搏动将液体泵入肺，使心肺由鲜红色转为淡红色，甚至白色，尽可能充分洗除其中血液，以免移植后发生超急性排斥反应。然后于近心端用3-0丝线结扎下腔和右上腔静脉，于奇静脉汇入处结扎左上腔静脉。于膈肌上方切断食管，用血管钳夹住食管残端向上提拉，切断主动脉和气管，整块取出供体心肺，浸泡于St Thomas液冰浴中。
移植心肺的修剪：在St Thomas液冰浴中，先去除食管、气管，然后去除胸腺和肺门淋巴结，剪去心包，用1-0丝线结扎右肺和尾状叶，保留左肺。大鼠左肺最大的解剖学特点是不分叶，十分容易辨认，不易被误扎。小心分离主动脉，于无名动脉处横断主动脉，并将其修剪平整。修剪完毕置0℃ St Thomas液冰浴。放入4℃冰箱做短期保存。
受体移植区准备：麻醉后，自受体鼠腹正中线打开腹腔，用橡皮筋拉钩拉开腹腔，将肠袢向右侧推，覆盖以温生理盐水纱布。打开后腹膜，在肾动脉下段游离腹主动脉和下腔静脉至髂总动脉止，不打开血管鞘将血管提起，选择无背后交通支处夹上2只小哈巴狗夹。将血流阻断，2夹间距离一般6～7mm较适宜。
心肺联合移植术：在受体移植区腹主动脉前壁用11#尖头手术刀片挑一小口，用弹簧手术剪扩大至3～3.5mm(视供心主动脉口径而定)。用5×105U／L肝素／平衡液冲洗血管残留血液。用8-0无创伤缝合线，先将供心主动脉与受体腹主动脉侧切口对角固定2针，另一侧中央固定1针，然后将对侧先做连续缝合，针距0.5～0.6mm，针缘约0.5mm，每侧最后一针均要与原对角固定针套缝。在缝合最后1～2针时用4℃ St Thomas液灌注供心主动脉，以排除气体，防止气栓。吻合完毕，打开远心端动脉夹，若吻合口仅极少量漏血，可打开近心端动脉夹，反复关闭4～5次，每次间隔10～15s漏血即可停止，否则要再加固缝合。心脏在有2～3次不规则收缩或数次纤颤后，很快转为有规律、节律整齐而有力的搏动。心脏总缺血时间一般在60min以内。术后常规给予10％糖盐水2～3ml，禁食12～20h。
三、手术制备大动物心脏及大血管疾病动物模型
1．人工瓣膜
体内评价人造心脏瓣膜的理想实验动物可选用绵羊，心脏大小可达到与成年人相似，适合人造瓣置换；其心脏结构和血流动力学也与人相似；能耐受体外循环，有较强的抵御心脏手术后感染的能力。常取左侧卧位，左侧开胸，第3或4肋间进胸，大湿纱布包裹左肺，显露并切开心包，体外循环建立。全身肝素化(4mg／kg)后，经升主动脉或降主动脉做双荷包或二三荷包缝合，插动脉管。二尖瓣替换时，经右心耳插单根二阶段心房插管。行肺动脉瓣(材料用主动脉瓣)替换时，右心耳插带气囊下腔静脉管，并经上腔静脉插直角管。机器预充除了常规的乳酸林格液外，还预充新鲜羊血，另外，降温应在(28.8+2.9)℃，防止温度过低导致心室颤动。人工机械瓣植入二尖瓣时沿左心耳长轴切开，心脏跳动下显露二尖瓣，植入肺动脉瓣(材料可用主动脉瓣)时在主动脉瓣环上横切主肺动脉约半个周径，心脏跳动下显露肺动脉瓣，3根4-0线沿3个肺动脉瓣窦、瓣环进针，再折叠缝合自体肺动脉瓣并以其为垫衬，最后缝合机械瓣，连续缝合将其置入。确认瓣膜启闭活动良好后，用4-0线闭合肺动脉切口。瓣膜植入手术完成后，应注意体外循环的管理，缓慢复温、调整流量，最终平稳停机。此后根据血压、静脉压情况，回输机器血，当血流动力学和血气代谢指标满意后，给鱼精蛋白中和肝素，拔管止血，放胸腔引流管，逐层关胸，接900C呼吸机。术后监测心电图、动脉压、静脉压、记尿量、胸引流量。定时查血气、电解质和血常规。定时翻身膨肺吸痰，间断利尿，补充新鲜血液，以防术后贫血。补钾。待羊的呼吸稳定，神志清醒，血气指标满意后，撤呼吸机拔管，并在胸腔引流量减少后尽早拔除胸管。开始静脉应用肝素治疗，维持激活凝血酶时间(ACT)在250s左右，术后第2天开始口服华发林，剂量6～9mg，l／d，同时口服阿司匹林0.2g／d，共用3～5d。术后早期(3～5d)定时查全血常规、凝血酶原国际标准化比率(INR)、电解质，听诊两肺呼吸音及瓣膜机械声音。此后，仅口服华发林，剂量平均(18.5+2.1)mg／d，l／d INR控制在3.54±0.55，调整抗凝血酶药物稳定后每个月行INR检测1～2次，必要时随时检查。
2．急性肺栓塞
啼栓塞(pulmonary embolism，PE)是来自静脉系统或右心内的血栓及其他异物流入肺动脉，引起一系列病理生理变化。PE的栓子99％为血栓性质。其病理、病理生理、临床表现与血栓的大小、形状及堵塞肺血管床的部位和范围有关，因而表现出不同的临床类型，即猝死型、急性肺心病型、肺梗死型和不可解释的呼吸困难型。PE的动物可选择兔或犬，模型制作多采用自体血栓注入法，动物麻醉后，经股静脉穿刺将导管插入右心房。从导管内取血，分别在体外静止20min及45min凝固后用作栓子。每次注入栓子0.5ml，用生理盐水冲注，每隔3min重复注入。若将新鲜血与氨基乙酸(EACA250mg／ml)混合，形成血凝块。然后取出制成直径25～35mm，长5～10mm的血块，静置1h。注入血栓数量、形状、性状、速度与急性PE不同类型有关，当一次注入的血栓量超过4.5ml时，可导致家兔猝死。解剖猝死家兔后，可见血栓堵塞一侧或双侧主肺动脉，在右心室、右心房内均可见条索状环绕成团块的血栓。少量多次注入血栓，家兔出现呛咳、呼吸急促、呼吸困难等症状，可闻及肺部哕音，类似临床急性肺心病表现，解剖后可见血栓堵塞肺叶或多处肺段动脉。实验中有家兔咳血丝样痰和泡沫血痰，类似临床肺梗死表现。解剖后发现血栓堵塞于肺小动脉远端，呈散在分布，未波及大血管。
3．房颤模型
开胸建立房颤模型一般采用右胸第5肋间或正中切开进胸，纵行切开并悬吊心包暴露心脏。在左、右心耳上分别固定心脏起搏电极，连接多功能程控心房刺激仪，选择刺激波输出，使S1较易落在心房的易颤期内诱发房颤。记录房颤诱发的次数和持续时间。静脉滴注0.2％的氯化乙酰胆碱，起始剂量16.7μg／min，5min后再行上述刺激。根据房颤诱发情况和持续时间成倍增大药物剂量，直至5次心房电刺激(称药物+心房电刺激)能诱发3次以上的持续性房颤。
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