A lincRNA-DYNLRB2-2/GPR119/GLP-1R/ABCA1-dependent signal transduction pathway is essential for the regulation of cholesterol homeostasis.

J Lipid Res 2014 Apr;55(4):681-97. PMID: 24493833

    为了探索巨噬细胞形成过程中RNA表达的可能变化，我们使用Arraystar探针数据集在Ox-LDL存在下对THP-1巨噬细胞和THP-1巨噬细胞衍生的泡沫细胞进行了微阵列分析，其中包括24,748个lncRNA和24,420个编码转录本。 使用Arraystar Human LncRNA Array v2.0平台产生来自三对THP-1巨噬细胞和THP-1巨噬细胞衍生的泡沫细胞的lncRNA和mRNA表达谱。基于每个探针组的平均表达值对表达值进行标准化。使用以下截止值，基于Student's t-检验，对配对样品的标准化表达值，鉴定不同表达的探针组：绝对倍数变化值大于3和P值小于0.01。结果显示，在THP-1巨噬细胞衍生的泡沫细胞中，lincRNA-DYNLRB2-2（BM973870 ; 16q23.3，chr16：79,831,946-79,861,047）表达上调（4.688倍，P <0.001），表明Ox-LDL和Ac-LDL影响THP-1巨噬细胞中lincRNA-DYNLRB2-2的表达水平。Ox-LDL / Ac-LDL以剂量和时间依赖性方式增加lincRNA-DYNLRB2-2表达（图1A，B）。  

    lincRNA-DYNLRB2-2的靶候选物,根据微阵列分析结果选择了一系列显示表达改变的基因。然后用LV-DYNRBP2-2转染THP-1巨噬细胞，并通过实时定量PCR和WB测量候选基因的表达。产生LV-DYNLRB2- 2并转染到THP-1巨噬细胞中（图1C ）。结果显示lincRNA-DYNLRB2-2显着增加GPR119表达（图1D，E ）。

然后我们研究了氧化低密度脂蛋白/ AC-LDL对THP- 1巨噬细胞中GPR119表达水平的影响，表明Ox-LDL / Ac-LDL处理以剂量和时间依赖性方式增加GPR119表达.mRNA和蛋白质水平（图1F​​ -I ）。用50μg/ ml Ox- LDL处理在诱导GPR119表达方面最有效，并且在培养24小时后观察到Ox-LDL / Ac-LDL对GPR119表达的最强诱导。

    这表明脂质代谢与先天免疫途径之间的串扰在动脉粥样硬化的发展和/或预防中起重要作用（26）。为了确定lincRNA-DYNLRB2-2和GPR119是否影响胆固醇代谢和炎症，我们首先检查了lincRNA-DYNLRB2-2和GPR119对THP-1巨噬细胞衍生的泡沫细胞中胆固醇代谢的影响。产生LV-DYNLRB2-2和质粒载体的pcDNA3.1-GPR119并转染到THP-1巨噬细胞中（图1C ，图2A ）。如图2B所示，过量表达的GPR119或过表达的THP-1巨噬细胞的lincRNA-DYNLRB2-2中的语-OX-LDL摄取显着降低。此外，LV-DYNLRB2-2和GPR119显着降低TG，游离胆固醇（FC） ，和胆甾醇酯（CE）的水平（表12

）。

GPR119参与lincRNA-DYNLRB2-2诱导的ABCA1表达和功能的上调

ABCA1在胆固醇代谢中起重要作用，并通过调节质膜和细胞内隔室中的胆固醇含量来影响细胞炎性细胞因子的分泌（1）。在这里，我们发现lincRNA-DYNLRB2-2和GPR119可以影响OX-LDL的摄取和外排，以及炎症因子的释放。因此，我们假设GPR119可能诱导ABCA1的表达和功能。然后我们检查了lincRNA-DYNLRB2-2和GPR119对THP-1巨噬细胞中ABCA1表达的影响。