【关键词】 指纹图谱 中药研究 综述
1 中药指纹图谱的概念
谢培山先生对中药色谱指纹图谱给出了以下定义[1]:中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的色谱鉴定手段。借以鉴别真伪、评价原料药材，半成品和成品质量均一性和稳定性。其基本属性是 “整体性” 和 “模糊性”。模糊性强调的是对照样品与待测样品指纹图谱的相似性，而不是完全相同，整体性是强调、比较色谱特征的 “完整面貌”，而不是将其 “肢解”，这样才能在不同环境的样品色谱中搜索和提取与该药材指纹图谱整体 “面貌” 相关的特征，加以鉴别。所
以说色谱特征的整体性及模糊性是中药色谱指纹图谱(图像)分析的最基本的属性。这种属性是来源于中药作为天然产物本身的 “不确定性(uncertainty)”，因为‘Nature never repeats itself'，何况植物的后生代谢产物受环境影响带来的变异。而带有不确定性的事物不能用解决确定性(certainty)事物的思维和方法来处理。所以分析色谱指纹图谱强调的是 “准确的辨认(accurate recognition)” 而不是 “精密的计算(precise calculation)”;较图谱强调的是相似(similarity)而不是 “相同(identical)”。
2 中药指纹图谱的基本特征
中药指纹图谱是一种综合的可量化的分析手段，中药指纹图谱的三个基本特征是系统性、特征性和稳定性。
2.1 中药指纹图谱应具有系统性
系统性是指指纹图谱反映了中药有效部位所含主要成分的种类或指标成分的全部。
2.2 中药指纹图谱应具有特征性
特征性是指指纹图谱中反映的化学成分信息是具有高度选择性的，这些信息的综合结果，将能特异地区分中药的真伪与优劣，成为中药自身的 “化学条码”，也称为专属性。
2.3 中药指纹图谱应具有稳定性
稳定性是指所建立的中药指纹图谱，在规定的方法与条件下，不同的操作者和不同的实验室能作出相同的指纹图谱，其误差在允许的范围内，这样才能保证指纹图谱具有通用性和实用性。
3 中药指纹图谱在中药研究中的应用
中药指纹图谱分析是对原药材、半成品、最终产品判断其真实性、质量一致性与稳定性的可行而有效的手段，在中药的药材鉴别、工艺生产、药效部位筛选、质量控制等方面的研究中应用广泛[2]。
3.1 道地药材
为了确保药材的质量稳定和临床用药安全，国家食品药品监督管理局(SFDA)首先提出在道地药材质量标准中引入指纹图谱技术的要求。
3.2 不同产地药材鉴别
不同产地的药材由于土壤、气候等环境因素及采收加工的不同，其指纹图谱存在较大的差异，对成品的指纹图谱有较大的影响，不同产地药材的指纹图谱研究对有效控制中药及其制剂的质量奠定了基础[3、4]
3.3 商品药材真伪鉴别
药材的真伪直接关系到成药的药效质量，甚至影响病人的生命健康，所以有必要用指纹图谱鉴别药材的真伪，控制成药的质量[5、6]
3.4 同一品种不同药用部位的鉴别
有报道[7]指出，同一品种不同用药部位的成分组成和含量有较大的差异，这对成品的稳定性和一致性有较大影响，对不同用药部位的指纹图谱研究有助于控制成品的质量。
3.5 在中药制剂质量控制中的应用
中药制剂在生产过程中影响因素众多，任何单一的活性成分或指标成分都难以准确、全面地评价中药质量。指纹图谱信息量大，特征性强，能给出大部分成分的色谱峰，有效地表征中药产品质量，利用标准指纹图谱追踪工艺过程及监测原药材与最终产品质量的稳定性、一致性，色谱指纹图谱可以较为全面地检测其多种成分在药材中分布的全貌，使药材的内在质量情况可视[8]。
4 中药指纹图谱的研究方法
近几年，中药指纹图谱的研究逐渐深入，设计的方法种类繁多，包括:①色谱法:传统的薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法和高效毛细管电泳法等;②光谱法:紫外光谱法和红外光谱法等;③波谱法:质谱法和核磁共振法等;④其他方法:如X射线衍射法，分子生物学方法等。其中色谱学方法是主流方法，尤其是TLC,HPLC和GC，已经成为大家所公认的三种常规的分析手段，是目前我们研究中药指纹图谱应优先考虑的方法[9]
薄层扫描法(TLC)构建中药指纹图谱，TLC法因具有分析直观、速度快等特点，广泛被用于指纹图谱的制定。中药指纹图谱方面的专家谢培山尤其在薄层扫描法指纹图谱方面研究较深入[10]，TLC法构建中药指纹图谱有以下特点:(1)选择TLC分离条件，包括常用薄层分离条件和薄层扫描条件。(2)TLC法构建中药指纹图谱显然起于TLC鉴别法，但TLC鉴别法主要针对单味药材或单个成分，同时因TLC法分离效能不高，因而实际应用中应注意其局限性。
高效液相色谱(HPLC)是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性、高效、快速的分离分析技术。在药品的质量控制(如主要成分的定性定量分析，杂质的限量检查和测定，稳定性考察等)，中药的非挥发性成分研究等方面都是重要的分析手段[11]，它给出的是高分辨率的轮廓图谱，重现性好，操作相对容易，而且相比于薄层色谱是封闭色谱系统，在线操作外界影响因素小，色谱稳定性好，在线检测设备可选性较大，很适合指纹图谱的实验研究和应用。其最大的特点在于:①使用的检测器种类多，紫外检测灵敏度高;②组分收集容易;③连用技术较成熟;④熟练技术人员多;⑤定量精密度较高(RSD<1%)等。
气相色谱法(GC)所得的色谱轮廓重现性、分辨率相对较好，提供的信息量大，操作简便，样品只需简单化学处理，而且由于是封闭色谱系统，外界影响因素较少，稳定性较好，检测设备可选性较大，此外，还可与顶空进样和固相微萃取技术联用，因而特别适用于挥发性药材及制剂的鉴别和含量测定。
随着色谱技术本身的飞速发展，单一的分析方法难以反映中药的复杂性，近年来采用多种现代分析仪器联用方式得到的多维多息特征谱的应用在增加[12]。如气相色谱与质谱联用仪(GC-MS)，液相色谱与紫外二极管列阵检测器联用仪(HPLC-DAD)，液相色谱与质谱联用仪(HPLC-MS )，毛细管电泳与紫外二极管列阵检测器联用仪(CE-DAD)和液相色谱与核磁共振谱( HPLC -NMR )等己开始进入实验室，如采用这样既有色谱分离特性又有光谱特性的联用仪器来进行中药色谱指纹图谱测定的话，借助近年来发展的化学计量技术和己有的光谱波谱标准库，是完全可能对大部分中药的化学成分进行定性和相对定量分析的。
5 当前存在的问题
5.1 目前所有指纹图谱都是以理化性质为分离手段所建立的色谱图，不能根据效应大小来分离成分，实现靶向提取分离的目的;
5.2 单柱的HPLC分析易受柱型号、柱温、流速等操作影响，指纹图谱不稳定，缺乏对所有成分都有响应质量或效应型检测器;
5.3 药材本身质量的稳定性;
5.4 色谱指纹图谱的方法学问题:首先各种色谱方法是互补的，任何色谱技术不可能适合所有药材的分析，选择方法应视研究对象的实际需要和可能以及按照不同色谱技术的特点和优势而定;
5.5 数据分析方法问题:由于目前对指纹图谱分析，仍采用单成分数学分析模式，为此不得不提高系统适应性、稳定性、重现性的要求，即指纹图谱总峰面积90%的峰应分离和按峰峰相应进行分析，共有峰的改变在5% -25%之间。
6 指纹图谱研究前景展望
指纹图谱作为一种中药质量控制的手段，逐渐掀起了方法研究的热潮，但是大多数研究者对指纹图谱在质量控制方面的全面认识仍较为浅显，仅把它作为一种简单的质量鉴别项目，侧重于研究指纹图谱获取方法，缺乏理论深度。中药指纹图谱的研究尚存在许多关键问题，中药指纹图谱要深入发展，并促进中药走向国际的进程，还需要作很多方面的研究。因此，在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究
的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，使中药指纹图谱能较完整地表征中药制剂复杂的物质基础(化学成分群)的大量信息的同时，也能够表征各种药理活性和药效作用(包括临床疗效)。采用对照品对照或化合物的鉴定，鉴定其主要特征指纹的化合物结构，以提高指纹图谱的可信度，并在两者基础上探索指纹图谱的获取方法，建立详细、完整地图谱库，将成为未来指纹图谱研究的重点及根本所在。[
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