免疫组化标记物：黑色素细胞标记和平滑肌/骨骼肌标记物

【黑色素细胞标记】

（1）HMB-45：单克隆抗体HMB-45鉴定Pmel 17基因产物gp100（Monoclonal antibody HMB-45 identifies the Pmel 17 gene product, gp100）。gp100抗原是黑色素前体蛋白（gp100 antigen is a premelanosomal protein），因此HMB45是黑色素体特异性的，但不是黑色素瘤特异性的。HMB45在约85%的经典型黑色素瘤中呈阳性，但在梭形细胞/促结缔组织增生性黑色素瘤中几乎从不阳性。HMB45在其他含黑色素小体的肿瘤中也普遍存在，如血管周上皮样细胞肿瘤和恶性色素性施万肿瘤（malignant melanotic schwannian tumors，也称色素性神经鞘瘤）。

（2）Melan-A：Melan-A是MART-1基因的产物，是黑色素前体膜的组成部分。总的来说，Melan-A的敏感性和特异性与HMB45非常相似。由于未知的原因，一些黑色素瘤表达HMB45，但不表达Melan-A，反之亦然。Melan-A在休眠的黑色素细胞和痣中更常呈阳性。广泛使用的A103克隆Melan-A也与类固醇产生肿瘤中存在的一个未知表位表现出可重复的交叉反应，例如，在肾上腺皮质肿瘤的诊断中是有用的（The widely used A103 clone to Melan-A also shows reproducible cross- reactivity with an unknown epitope present in steroid- producing tumors and is useful in the diagnosis of adrenal cortical tumors, for instance）。

（3）酪氨酸酶（Tyrosinase）：酪氨酸酶是一种参与黑色素合成的酶。对酪氨酸酶的抗体具有与HMB-45和Melan-A大致相当的敏感性和特异性。

（4）小眼转录因子（Microphthalmia Transcription Factor）：小眼症转录因子（MiTF）是MITF基因的产物，是黑素细胞发育的关键转录因子。MiTF基本上在所有休眠的黑色素细胞和痣中表达。MiTF在90%以上的上皮样黑色素瘤中表达；梭形细胞黑素瘤的阳性频率较低（40%），真正的促结缔组织增生性黑色素瘤的阳性频率极低（<5%）。MiTF也在几乎所有的透明细胞肉瘤和PEComas中表达。然而，MiTF的表达并不局限于黑色素细胞肿瘤，在富于细胞性neurothekeomas、平滑肌肉瘤、非典型性纤维黄色瘤、非典型性脂肪瘤样肿瘤（atypical lipomatous neoplasms）和非常罕见的癌中也可见到。MiTF最适合用于确认S100蛋白/SOX10阳性、HMB-45/Melan-A/tyrosinas阴性但疑似黑色素瘤的肿瘤。

图1 真皮血管周上皮样细胞瘤（PEComa）形态学；

图2 真皮血管周上皮样细胞瘤（PEComa）局灶表达HMB45；

【平滑肌和骨骼肌标记物】

（1）Desmin：Desmin是与平滑肌和骨骼肌分化相关的中间丝蛋白。Desmin表达在肌纤维母细胞病变中较少见。Desmin是骨骼肌肿瘤最敏感的标记物，在所有亚型横纹肌肉瘤和横纹肌瘤中几乎100%表达。Desmin在平滑肌肿瘤中是一个相当不敏感的标记物，因为在正常血管平滑肌和来自这类细胞的肿瘤中，Desmin通常是阴性的。然而，Desmin的表达对肌源性肿瘤并不是特异性的，可能在尤文肉瘤、促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤、间叶性软骨肉瘤、间皮肿瘤、肌腱滑膜巨细胞瘤、骨化性纤维黏液样肿瘤、血管瘤样纤维组织细胞瘤、神经鞘瘤和黑色素瘤中可见。

（2）平滑肌肌动蛋白（Smooth Muscle Actin，SMA）：平滑肌肌动蛋白异构体（最常与1A4克隆鉴定）主要在所有良性和恶性平滑肌肿瘤中表达，包括血管球瘤和其他“肌周”细胞肿瘤，如肌周细胞瘤和肌纤维瘤，以及肌纤维母细胞病变，如结节性筋膜炎（图2.4）。平滑肌肌动蛋白也常出现在有肌上皮分化的肿瘤中，如混合性肿瘤和肌上皮瘤。一般而言，肌纤维母细胞仅在其细胞质的外围表达平滑肌肌动蛋白，呈所谓的“有轨电车”模式（“tram-track” pattern）；这与平滑肌中均匀的细胞质表达形成对比。使用1A4单抗需要注意的一个陷阱是异常的核交叉反应，这是在许多实验室中偶尔见到的现象。核1A4免疫反应不应作为任何肿瘤平滑肌分化的证据。

（3）MyoD1和Myogenin：MyoD1和myogenin是DNA结合肌原性核调节蛋白的基本螺旋-环-螺旋家族成员，在胚胎骨骼肌分化过程中负责编码结构蛋白（如desmin）的基因激活。在所有类型的横纹肌肉瘤中，>95%病例表达MyoD1和myogenin；腺泡状横纹肌肉瘤倾向于表达非常高水平的myogenin和相对较少的MyoD1，而胚胎型和梭形细胞/硬化型横纹肌肉瘤往往表现出相反的模式。MyoD1和myogenin的表达对横纹肌母细胞分化具有高度特异性，但重要的是要记住，它们可能在显示异源性横纹肌母细胞分化的肿瘤中表达，如鳞状细胞癌、黑素瘤和Merkel细胞癌（图2.5）。

（4）H-Caldesmon：重钙调素结合蛋白（Heavy caldesmon）是一种钙结合蛋白，参与平滑肌收缩性调节。虽然H-Caldesmon对平滑肌肿瘤的敏感性低于平滑肌肌动蛋白，但在肌纤维母细胞性肿瘤中不表达h-caldesmon。H-Caldesmon常在血管球瘤中表达。H-Caldesmon通常用于鉴别低分化平滑肌肿瘤与肌纤维母细胞性肿瘤，而不是作为平滑肌细胞的一线标记物。

图3 血管球瘤弥漫性表达平滑肌肌动蛋白（SMA）；

图4 Merkel细胞癌异常表达骨骼肌标志物，包括desmin（未显示）和myogenin（如图）。