《APTT纠正试验专家共识》解读（一）---NPP的制备！

《活化部分凝血活酶时间延长混合血浆纠正试验操作流程及结果解读中国专家共识》经过30位专家、近一年半的辛苦撰写和修改，已在《中华检验医学杂志》刊出，笔者根据个人的工作经历谈一下对专家共识的理解和体会。

活化部分凝血活酶时间（APTT）是出凝血功能评价的筛选试验，其结果延长常见于凝血因子缺乏、存在狼疮抗凝物（lupus anticoagulant，LA）或凝血因子抑制物等。明确诊断需检测凝血因子、LA和凝血因子抑制物等。APTT延长混合血浆纠正试验（简称APTT正试验）是将患者血浆（patient plasma，PP）与正常混合血浆（Normal Pooled Plasma，NPP）按照一定比例混合后多次检测 APTT，评估混合血浆 APTT纠正的程度，为确诊试验的选择提供指导。

• APTT正试验的理论基础和依据

混合血浆纠正试验是当PP凝固时间不明原因延长时，将PP与NPP按照一定比例混合后，重新检测凝固时间的筛选试验。通常当所有凝血因子活性水平在50%及以上时，即可确保APTT维持在参考范围内。因此当缺乏一种或多种内源性凝血因子的PP与NPP（理论上所有凝血因子活性在100%左右）按1:1的比例混合后，理论上混合血浆中凝血因子活性均应≥50%，APTT检测结果可纠正至参考范围内。而当PP存在凝血抑制物，如抗凝药物、凝血因子抑制物、抗磷脂抗体等时，混合后APTT不能纠正至参考范围内。混合血浆纠正试验的目的即是初步判断延长的血浆凝固时间是由于缺乏凝血因子还是存在凝血抑制物所致，指导进一步确诊凝血试验的选择。混合血浆纠正试验主要应用于APTT，当然也可应用于凝血酶原时间（PT）及凝血酶时间（TT）。

• 重点关注的话题：NPP的制备！

原则上建议优先使用商品化正常血浆用于APTT纠正试验，可以做到结果的标准化。如果无法获得商品化正常血浆，可选择至少20份（男女比例1:1）常规凝血试验均正常的血浆混合制备。通常将源自每名供者的等体积血浆（建议等体积）合并到同一容器中，混合后再次离心（离心力1500×g，时间15min）。

重点来了：一定要再次离心！！！

为什么？看图就知道了。

病案分析

·45岁男病，因罹患舌部鳞状细胞癌，计划接受淋巴结切除手术。无个人和家族出血史，术前凝血筛查PT为11.5 s(参考值9.0-12.5秒)，APTT为38 s(参考值25-35秒)。APTT即刻纠正试验显示纠正至33秒，因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ均正常。---结果似乎有点矛盾呢！？

·在连续倍比稀释患者血浆后对FⅧ重新检测，结果显示FVIII活性水平高于稀释前结果，狼疮抗凝物+（DRRVT）。

复盘整个试验过程，有瑕疵：

1.本例试验中NPP是通过收集5例患者的血浆制备；

2.混合血浆未做到二次离心，没有做到制备成无血小板血浆，导致患者的弱狼疮抗凝物的在纠正试验过程中被稀释，同时血小板提供磷脂导致纠正试验结果为“纠正”。

本案反思：NPP的制备是纠正试验的第一步，也是最为关键的一步，所谓一步错步步错。所以二次离心制备NPP尤为重要！

纠正试验:从NPP的制备做起!!!

文案：宋鉴清

编辑：大树