最全LC-MS解析（二）

       在最全LC-MS解析（一）中为大家介绍了LC-MS的一些基础性概念，帮助大家更清楚地了解LC-MS的工作原理及一些基础知识的储备。今天大家重点介绍LC-MS的分析方法及一些常遇到的一些问题的解答。

一、LC-MS特点及局限性

1、LC-MS特点：

   a) 监测反应进程，具有定性和定量的特点；

   b) 通过分子量确认，初步判断反应效果及成功与否；

   c) 跟踪反应原料的消耗、产物和副产物的生成以及检测其大致含量；

   d) 灵敏度高，检测快速，便于混合物分析。

2、LC-MS局限性：

   a) 部分化合物由于其特殊结构或带有某些基团，在LC-MS中检测不到m/z值，这时需要借助特殊离子源或结合HNMR来分析得到的分子结构；

   b) 某些化合物在LC-MS中出峰较宽，会掩盖一些分子离子峰，需借助TLC、HPLC或HMNR进行判断；

   c) 某些化合物的特殊结构，导致在LC-MS中只出碎片离子峰，需要合成人员具有丰富的解析经验；

   d) 异构体，立体化学分析区分差。

二、测试样品的准备

1、样品溶剂：

       送LC-MS样品的溶剂较多使用MeOH, MeCN, H2O等进行溶解，对于难溶样品可以加少量DMF或DMSO助溶，过滤后再送样。

       对于反应本身是非均相体系（有产物析出）或反应本身使用的是醇，MeCN，H2O，DMF或DMSO等为溶剂时可以直接取样、稀释、过滤后送样检测。

Note:

     a) 测试LC-MS使用的溶剂中不能含有脂溶性的溶剂如EtOAc, DCM, CHCl3, toluene等，它们的存在可能会损坏液相色谱柱！ 

     b) 进样的LC-MS样品不能是强酸或强碱性体系！

     c) 不能还有无机盐，不能含有氘代试剂！

     d) 进样样品必须进行过滤，确保溶液澄清透明，否则堵塞柱子，造成柱压过高，损坏仪器！

2、样品需淬灭后送样：

     对于有活泼金属试剂（如NaH, BH3, n-BuLi, LiAlH4, i-PrMgX, DIBAL-H等）参加的化学反应在送样前，需要加水或甲醇淬灭后方可送样监测。

3、样品进样浓度：

       进样浓度不能太稀更不能太浓！浓度一般在0.1g/mL左右。太稀不能准确反映反应效果情况，不利于解析；太浓的话一方面目标峰容易被一些杂质峰掩盖，另一方面容易造成残留会污染仪器进而污染其它样品。

三、质谱解析的一般步骤

1、首先确定分子离子峰和相对分子质量

分子离子峰的判断条件：

   a) 质量数是否符合氮元素规则；

   b) 该峰与邻近峰之间的质量差是否符合碎片离子峰差值；

   c) 排列和拼凑碎片离子峰的可能结构归属，如[M-1]⁺（失质子H），[M-15]⁺（失CH3），[M-18]⁺（失H2O），[M-20]⁺（失HF），[M-55]⁺（失-^tBu）和[M-99]⁺（失-Boc）等。

   d) 根据化合物类别，注意是否检测到[M+1]⁺（如酯、胺、酰胺、腈和氨基酸等）和[M-1]⁺（如酸、醇、醛、酮及含氮化合物等）。

Note:      

       此方法适用于低分辨小分子谱图且已知目标化合物结构和相对分子量，而高分辨质谱仪可以精确测量分子量！

       对于未知目标分子结构和相对分子质量的情况下，可以通过结合除了以上方法外的下面几种方法进行综合判断：

   e) 根据分子离子质量的奇偶数和氮律规则，推测分子中含N原子的个数； 

   f) 根据同位素峰强度的大小及比例或通过计算(M+1)/M及(M+2)/M数值的大小，推断分子结构中是否含有Cl, Br, S等原子，并推算分子式；

   g) 由分子式计算不饱和度（Ω）；

   h)  以所有可能连接方式拼接部分结构单元，组成可能的结构式，并结合其它方法确定最终化合物结构。

声明：

        部分知识参考网上资源，如有雷同或侵权，请联系删除！