抗体的保存方法一般会直接影响抗体的活性和使用效果。在保存得当的情况下,大部分抗体可以存放数月甚至数年,一般情况需严格按照抗体说明书来进行保存。
① 抗体收到后,需在12000rpm离心1~5分钟,再打开管盖进行分装和保存,如果抗体体积不足50 ul,可延长离心时间至 5 分钟,从而确保抗体全部离心下来。
② 对于多数抗体而言,分装成小等份并冻存于-20℃或-80℃是最佳选择。腹水形式的产品收到后需立即冻存,因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在置于4℃条件会导致抗体的降解。
③ 抗体的运输:一般选择4℃运输,避免了反复冻融对抗体活性的损害;如若选择干冰运输,收到抗体是冰冻的,分装时解冻,会增加一次冻融的过程,所以运输过程中尽量避免干冰运输。
① 加入甘油:对于大多数抗体,可加入50%的甘油来避免反复冻融。甘油在-20℃可降低冰点,但不建议加入甘油的抗体保存于-80℃,该温度已经超过了甘油的冰点;
② 加蛋白保护剂:蛋白在高浓度时不易降解,正如有些抗体会加入BSA作为稳定剂的原因,同时加入蛋白也可减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
③ 加入叠氮化钠:为了防止微生物污染,经常选择加入叠氮化钠到抗体中(终浓度 0.02% (w/v))。但在下述情况中不能使用叠氮化钠:
此外,如果需要去除叠氮化钠,可以通过凝胶电泳或过滤的方式(IgG 的分子量是 150kDa,叠氮化钠的分子量只有65Da),使用cut off 14kDa的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。
联系客服