技术前沿 | 枯草芽孢杆菌BL-1抑菌效果评价（２）

1 材料与方法

1.1 实验场地

实验在山东省东营市垦利县三角洲养殖公司的小温棚进行。该温棚养殖池规格为4m × 8m×0.9m，水温28℃左右，每天换水量约25%。南美白对虾p5规格苗种标粗5天，养殖密度为5000尾/m²左右。

1.2 实验材料

水质测定采用水博士试剂盒，购自北京桑普生化。

弧菌测定采用TCBS培养基，购自青岛海博。

BL-1发酵液由青岛根源生产研发通过二级发酵而成，噬菌1号由青岛根源生产，过硫酸氢钾购自市场。

1.3 实验方法

1.3.1 选取条件一致的水泥池随机分为5组，每组3个平行，分组如下：A组：过硫酸氢钾2ppm；B组：BL-1 2ppm；C组：噬菌1号1ppm ；D组：BL-1 1ppm，间隔一天再使用一次； E组：BL-1 5ppm。

1.3.2 每天同一时间取水样用水博士试剂盒检测氨氮、亚硝酸盐和pH。

1.3.3 采用TCBS-平板涂布法检测每个池子实验前后5天的弧菌变化，每个池子做三个重复。

2 结果与分析

2.1 水质指标变化

通过检测显示该实验场地实验前后水质指标较稳定，每天基本一致：氨氮含量为3.0mg/L，亚硝态氮含量为0.005mg/L，pH为8.2。由于人工换水和加热等因素影响，水温经常会有波动，28℃上下浮动1℃。可基本排除水质等因素对弧菌变化的影响。

实验前期对池塘弧菌测定显示，不同池塘中弧菌浓度在0.96×10⁴-5.11×10⁴CFU/mL。

2.2 弧菌去除率变化

使用2ppm的BL-1与使用2ppm的过硫酸氢钾效果相当，前2天弧菌去除率达到50%左右，第3天弧菌有所反弹（去除率降到20%左右），第5天弧菌达到初始水平。使用5ppm的BL-1效果最佳，在5天内弧菌去除率均能达到80%左右。使用噬菌1号或间隔使用2次1ppm的BL-1，弧菌去除率在前3天均能达到较高水平（50%左右），在第5天出现反弹，去除率下降。综合看来使用效果为：直接使用5ppm的BL-1＞1ppm的BL-1使用2次≥使用噬菌1号1ppm＞使用2ppm的BL-1≈使用2ppm的过硫酸氢钾。说明在弧菌较多的高密度养殖池中使用BL-1，能够明显抑制弧菌的生长与繁殖，随用量升高，抑制效果变强，且与使用方法有关，其在水体中有效时间长于市场产品过硫酸氢钾。

图1  不同产品使用前后的弧菌含量变化

图2 使用不同产品后弧菌去除率变化

图3 使用产品前后弧菌数量变化平板图

3 小结            

近年来，随着养殖水域生态条件的变化、养殖密度的加大及养殖过程中自身污染的加重，弧菌已成为水产养殖动物的主要病原之一，是对虾肝胰腺坏死、白便、EMS，鲆鲽鳎肠炎、腹水和组织出血等的主要致病因子，给水产养殖业造成巨大经济损失。目前，在水产养殖生产过程中，抗生素和消毒剂的使用仍是解决水产养殖动物弧菌病的重要手段，它能在短期内起到良好的治疗效果，但其有效时间短，且会破坏水体菌群平衡，造成弧菌再次爆发。以菌抑菌是一种安全可靠的措施，也是未来发展的重要方向。本次实验所应用的BL-1对养殖水体中的弧菌表现出了较好的抑制作用，且用量越大，抑制效果越好，持续时间越长，具有较好的应用前景。

作者：刘宝同