外泌体是不是很火?其实外泌体之前我也给大家讲过哦,只是估计你们没好好看而已。
其实外泌体可以理解为细胞排泄出来的代谢产物,后来才发现,有点作用的。
外泌体研究到底复不复杂呢
?其实不复杂
。早在2014年的时候,J Extracell Vesicles
上就发表了一篇外泌体研究指南:
不要觉得这个指南过期了哈
,其实一直到现在都还是有价值的,这篇蚊帐提到了大致两点
:
1)外泌体的研究,首先要证明外泌体存在
2)要证明外泌体的功能
证明外泌体存在
,就需要用电镜和蛋白marker双重证明
,当然他们也举了点蛋白Marker的栗子
:
那功能呢
,就需要使得外泌体被荧光标记后
,被吞入靶细胞的证明,然后验证靶细胞的变化
。
其实就这么简单,我们可以举个外泌体蚊帐的栗子
,下面这篇蚊帐发表在
Cellular Physiology and Biochemistry(和OT一样被踢去前还有五分多,当然,不要在意这些细节,因为这篇蚊帐发的时候还是有IF的)上:
这主要做的是乳腺癌外泌体里包含的一个miRNA的功能作用,首先他们证明了有外泌体的存在
,电镜&蛋白Marker(
外泌体存在√)
:
接着说明了一下这个miRNA在乳腺癌中高表达(所以才会被分泌出去对别的细胞产生影响
),而正常乳腺细胞中低表达
:
接着他们给miRNA做了Fam荧光标记
,然后分离出了外泌体,这时候外泌体有荧光了。然后将分离出来的外泌体和正常乳腺细胞一起培养
,发现外泌体和miRNA被吞了进去(
外泌体被吞√),然后正常乳腺细胞的增殖啊、耐药啊等等功能都变了(
外泌体功能√):
最后用最直接的miRNA功能研究(也就是对靶基因的蛋白翻译)做了个验证
:
全文完
……
其实我们不难发现,外泌体的研究指南里
,已经给我们阐明了最基本的外泌体研究的关键步骤
。步骤和思路都不难,难的是实验实在是有点小难度
,别说分离了
,还带荧光去让靶细胞胞吞
,估计只有做这些实验的人才能感同身受吧
,好了,今天就先策到这里吧,想要看看
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