在生物实验中,应该会经常使用到生物缓冲液,而在生物缓冲液中Tris属于常用款了。作为生物缓冲液中使用比较广泛的一款,应该有很多人知道这个名字,但是也有一部分人还不了解它,下面我们可以一起看看关于Tris的原理和应用。
Tris全称为三羟甲基氨基甲烷,又叫氨基丁三醇,CAS号为77-86-1,外观为白色结晶粉末。可溶于乙醇和水,也会与乙酸乙酯溶解但是比较缓慢,不与乙醚、四氯化碳,对铜、铝有腐蚀作用。
Tris大量应用于急性代谢性及呼吸性酸血症,属于一种碱性缓冲剂,对代谢酸中毒和酶活动反应具有良好的缓冲作用,可能引起低血糖、低血压、恶心、呕吐。甚至会抑制呼吸导致呼吸停止。过量摄入或者肾功能不全时可引起碱血症。当Tris和酸量滴定法基准物质使用时,纯度要求会很高,基本为99.9%-100%
Tris因为是弱碱性,在温度为25℃以下时,Pka为8.1,但是依据缓冲理论,它的有效缓冲范围在PH7.0-9.2之间。而Tris的水溶液PH在10.5左右,一般用加盐酸来调节PH值到所需值,不过同时也要注意温度对Tris的Pka的影响。由于Tris缓冲液是弱碱性溶液,DNA会在溶液里被去质子化,从而提高其溶解性。所以经常有人在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成TE缓冲液,而且把PH值调节的溶液换成乙酸,就可以获得TAE缓冲液。
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