色原底物ESPMT（SOX）法测定

色原底物ESPMT化学名称为N-乙基-N-磺丙基-3-甲基苯胺钠盐，也简称TOPS，属于新型Trinder’试剂中的一种，广泛应用于葡萄糖、甘油三酯、胆固醇等生化指标的检测。比如ESPMT用于肌酐的肌氨酸氧化酶（SOX）法测定。

血清和尿中都含有肌酐，它是肾功能常用的常用指标，也是健康体检的必检项目。肌酐（creatinine，Cre），化学式是C4H7N3O，是肌肉在人体内代谢的产物，主要由肾小球滤过排出体外。每20克肌肉代谢克产生1mg肌酐。 

色原底物ESPMT测定肌酐

ESPMT测定肌酐原理：

肌酐在肌酐酶（肌酐亚氨基水解酶）的催化下水解成肌酸，肌酸在肌酸酶CRH（肌酸脒基水解酶）催化下水解成肌氨酸和尿素，然后用肌氨酸氧化酶SOX将肌氨酸氧化成甘氨酸、甲醛以及过氧化氢。生成的过氧化氢即可以用ESPMT与4-AAP在过氧化物酶存在下进行测定，生成的显色产物含量与肌酐浓度成正比，与光度计测得的吸光度成正比。

试剂准备：

试剂1，由肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化氢酶、ESPMT组成；试剂2，由肌酐胺基水解酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林（4-APP）组成；校准品：肌酐溶液。

试剂要求：

1. 试剂溶液应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2. 液体试剂的净含量应不少于标示值。

3. 试剂以去离子水为空白对照，在37摄氏度546nm波长条件下，吸光度应小于0.2A。

4. 当样本浓度为60umoL/L时，吸光度变化应不小于0.016A。

5. 试剂检测范围应在10-7000umoL/L，线性相关系数r应不小于0.9900，当样本浓度不大于390μmol/L时，线性绝对偏差应不大于±39.0μmol/L；当样本浓度大于390μmol/L时，线性相对偏差应不大于±10.0%。变异系数小于0.03，相对偏差小于0.05。

以色原底物ESPMT测定肌酐是比较常用的方法，由于过程中会生产肌氨酸和尿素，也可以通过尿素检测的方法来测量，灵敏度不如SOX法。