Trinder's试剂的溶液保存后变色是为什么

在最近有客户反应，自己配置好的EHSPT（也叫TOOS）溶液本来是透明的，可是放置了两天后变成黄色或红色了，这是什么原因，是否还能使用呢？

Trinder's试剂溶液变色原因：

像EHSPT、MAOS等显色底物都属于新型Trinder’s试剂，都属于高水溶性苯胺钠盐的衍生物，被氧化后会产生红色或黄色的物质。Trinder’s试剂粉末是不容易被氧化的，配制成溶液后需要密封冷藏，尽量配多少用多少；如果溶液长时间暴露在空气中且温度偏高的话，它们可能会被空气中的氧缓慢氧化，从而出现溶液变色的情况。

Trinder’s试剂用于酶联免疫分析

Trinder's试剂检测原理：

EHSPT、MAOS等Trinder's试剂，可以在过氧化物酶存在下，被过氧化氢氧化（TOOS、MAOS等需要与4-AAP偶联）氧化生成红色醌亚胺物质，从而通过光度计测量吸光度来检测能生成或氧化氢的被测样品的含量。

新型Trinder’s试剂都是具有还原性的显色试剂，原本是没有颜色的，当它们在过氧化物酶催化作用下被氧之后，就能生成有颜色的氧化产物。但是EHSPT等色原底物在溶液中相对不够稳定，被氧化性杂质污染或者长时间接触空气，会使它们缓慢氧化，从而溶液发生变色。因此，色原底物在配成溶液时，一般建议现配现用，防止其被污染或者氧化变质。

Trinder's试剂相比于TMB的优势：

用TMB作显色试剂时，检测的波长为450nm的最大吸收波长和405nm波长，而血清中胆红素的吸收波长在380~530nm，会对检测结果造成干扰，且要在酸性条件下做颜色反应，限制了它的应用。新型Trinder’s试剂的颜色反应产物的紫外吸收＞540nm，MAOS、MADB甚至高达630nm，且反应对PH范围要求较宽，受血清中其他物质干扰更小，可以针对需要高精确值的检测项。

目前除了化学发光免疫分析外，用的较多的就是酶联免疫分析，新型Trinder’s试剂是其中重要的显色底物