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体液细胞形态学检查是指除血液以外的各种体液，如胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液等，在完成一般性常规检验的基础上，将沉渣制成涂片，经瑞-吉染色后，在显微镜下进行细胞形态学观察，作出检验提示或诊断（报告细胞分类、肿瘤细胞、微生物、寄生虫和结晶等）。目前这项检查也越来越受到临床检验实验室的重视和临床医生的青睐。但多数情况下，病人的病情是一个复杂的综合体，可能仅仅依据某一项检查不能作出准确的诊断和鉴别诊断。临床医生在获得病人体液标本后，一般会送检常规形态、生化、微生物或免疫学检查，本文主要讨论体液浆膜腔积液的相关检查有哪些。
常规检查
浆膜腔积液的常规检查包括外观（颜色、性状）、有核细胞计数、红细胞计数及有核细胞分类。细胞计数可采用显微镜法和仪器法，显微镜法为牛鲍计数板进行人工细胞计数；而仪器法多使用的是血细胞分析仪的体液模块，以 Sysmex XN 系列的仪器为例，红细胞 RBC-BF 用 RBC 通道，电阻抗法，有核细胞 TC-BF 用 WDF 通道，核酸荧光染色流式细胞法。仪器法可以得到以下参数：有核细胞总数（TC-BF#）、单个核细胞绝对值和百分比（MN#，MN%）、多个核细胞绝对值和百分比（PMN#，PMN%）、嗜酸性粒细胞绝对值和百分比（EO#，EO%）、高荧光强度的有核细胞绝对值和百分比（HF#，HF%）。HF 提示可能存在肿瘤细胞或者间皮细胞、巨噬细胞等，因此 HF 可用来筛查肿瘤。
但我们也不能过分依赖仪器，如仪器可能会把花瓣样淋巴细胞归类为多个核细胞，可能会把一些轻中度核异质细胞报告为肿瘤细胞，这些都需要检验人员在工作中注意鉴别。
积液生化、免疫学检查
1、葡萄糖、氯化物：低于血清水平，同时伴有核细胞数升高，提示感染。
2、乳酸脱氢酶（LDH）：降低提示炎症消退，升高提示病情恶化。
3、蛋白：可用于鉴别积液性质，但特异性低。
4、脂类：鉴别真、假性乳糜性积液。
5、腺苷脱氨酶（ADA）:结核性积液时常升高（不特异），可作为观察抗结核药物治疗有效性的指标。下图的检测流程[1]也许可以作为判断积液来源的参考（MPE：恶性积液，TPE：结核性积液）。
6、癌胚抗原：恶性积液的非特异性指标，积液CEA/血清CEA>1.0提示恶性可能，积液CEA/血清CEA<1.0提示良性可能。
7、铁蛋白：<500μg/L提示良性可能，>500μg/L提示恶性可能。
8、干扰素-γ（IFN-γ）：对诊断结核有一定意义。
老指标，新搭配
以上常规检查项目在国内很多医院都可开展，但这些项目的对疾病诊断的准确性无法令人满意，仅能作为监测指标或起提示性作用。许多学者将这些老指标进行重新组合和搭配，使之表现出更好的诊断价值。
1. 血清-腹水白蛋白梯度（serum-ascites albumin gradient，SAAG）：传统积液性质分类以积液总蛋白 25g/L 作为主要判断指标，鉴别的准确性较低。经典的积液性质的比较可罗列出多条，其中对于胸腔积液性质的判断，有三条比较重要：积液蛋白/血清蛋白 >0.5，积液 LDH/ 血清 LDH>0.6，积液 LDH>200U/L，对判断渗出性胸水有较高敏感性，但鉴别腹水的准确性较低。Hoefs 等人提出的 SAAG 与门脉压力呈正相关，能较真实的反应门静脉压力，根据 SAAG 的值将腹水分为两类：SAAG≥11g/L 为高梯度腹水（如肝硬化等），SAAG<11g/L 为低梯度腹水（如结核、肿瘤等）。SAAG 可使腹水分类更准确，但要注意影响该指标的影响因素，任何影响白蛋白检测的因素均会影响 SAAG，如乳糜性腹水，球蛋白过低或过高等。
2. Cancer ratio（血清 LDH/ 积液 ADA）：比值 >20 对渗出性胸腔积液患者的恶性程度具有较高的预测价值[2]，据文献报道，在区别恶性积液与结核性积液、感染性积液方面，该指标的灵敏性 98%，特异性 94%。
3. Cancer ratio plus（Cancer ratio/ 积液淋巴分类计数%）：在以淋巴细胞为主的积液中，该比值 >30 时[3]，鉴别出恶性积液的灵敏性 97%，特异性 94%（以结核性积液的病人为对照）。
4. NLR，PLR（外周血中性粒细胞数/淋巴细胞数，外周血血小板计数/淋巴细胞数）[4]：预测肿瘤侵袭、转移。高比值与肿瘤恶性程度和生存期短有相关性。
分子生物学方法
1. 已经应用于临床的检验项目，如流式细胞分析与 DNA 倍体分析、染色体、白血病/淋巴瘤免疫表型分析、流式标记肿瘤抗原检测等，已广泛应用于白血病和恶性肿瘤的诊断，采用的标本类型以外周血为主。
2. 液体活检：检测血液或体液中的循环肿瘤细胞 (CTCs)、循环肿瘤 DNA（ctDNA）或外泌体等的方法，称之为液体活检。目前采用的标本类型虽以获取方便的外周血为主，但浆膜腔积液脱落细胞是检测致癌基因突变很有价值的标本。如：
1）肺癌诊断指南推荐的8种基因（EGFR、HER2、KARS等）检测中，外周血和胸腔积液均可收集用于检测 EGFR，而肺泡灌洗液可作为一种检测肿瘤基因突变的补充方法；
2）虽然检测乳腺癌 HER2 基因的标本多来自穿刺组织或外周血，对于怀疑乳腺癌胸腔转移的病人，胸水也是一个很好的检测材料，可检测 MTA1、VEGF 等的表达异常；
3）基因检测同样适用于尿液，尿液中检出 PCA3 基因突变对临床诊断前列腺癌有重要意义。
体液标本的基因检测还可应用于多种转移性肿瘤，此处不再赘述。可能由于临床医生和检验人员对体液标本检测肿瘤基因的价值认识不够，体液标本的基因检测在实验室开展不多，其广阔的应用前景会随着检测技术的进步而逐渐实现，使之更广泛地应用于肿瘤个体化治疗的基因检测。
3. 组学：蛋白质组学、微生物组学、代谢组学、转录组学等组学研究有助于发现肿瘤标志物、治疗新靶点等。每一种组学研究都是一个复杂的研究课题，由于本人学识有限，在此不再叙述。
以上为本人在学习过程中的小总结，由于能力和学识有限，内容并不全面，欢迎老师补充，另如有错误之处，请批评指正。一些老指标新搭配的使用以及一些分子生物学方法尚未应用于临床，在研究设计时选择的阴性对照不同，可能会得到完全不同的结论，因此在推广之前需要更多的研究数据支持。同时，在此感谢浙江省人民医院检验中心吴茅教授的倾囊相授，愿与老师们互帮互助，共建共享，共同推动体液细胞形态学检查的推广和应用。
参考文献：
[1] Darooei, R., G. Sanadgol, A. Gh-Nataj, et al. Discriminating Tuberculous Pleural Effusion from Malignant Pleural Effusion Based on Routine Pleural Fluid Biomarkers, Using Mathematical Methods[J]. Tanaffos, 2017. 16(2): 157-165.
[2] Verma, A., J. Abisheganaden, and R.W. Light. Identifying Malignant Pleural Effusion by A Cancer Ratio (Serum LDH: Pleural Fluid ADA Ratio)[J]. Lung, 2016. 194(1): 147-153.
[3] Verma, A., R.S. Dagaonkar, D. Marshall, et al. Differentiating Malignant from Tubercular Pleural Effusion by Cancer Ratio Plus (Cancer Ratio: Pleural Lymphocyte Count)[J]. Can Respir J, 2016. 2016: 7348239.
[4] Yodying, H., A. Matsuda, M. Miyashita, et al. Prognostic Significance of Neutrophil-to-Lymphocyte Ratio and Platelet-to-Lymphocyte Ratio in Oncologic Outcomes of Esophageal Cancer: A Systematic Review and Meta-analysis[J]. Ann Surg Oncol, 2016. 23(2): 646-654.
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