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Worthington丨心肌黄酶说明书及特性

心肌黄酶是一类普遍存在的黄素结合酶,其催化从还原形式的二和三磷酸吡啶核苷酸即NADH、NADPH中充当氢受体的各种染料的还原。种被纯化的酶是来自心肌的酶(Straub 1939)。近二十年后,心脏心肌黄酶被证明与硫辛酰脱氢酶相同(Massey 1958, 1963)。其他心肌黄酶已被描述并从各种细菌、植物和哺乳动物器官中纯化。部分纯化的克氏梭菌提取物的心肌黄酶活性细胞,最初被描述为 NADH 和 NADPH 氧化酶的来源(Ciotti 和 Kaplan 1957),在该实验室中进行了观察,并将其用于脱氢酶和乙醇的耦合比色测定。(泰勒 1958 年)。这些基于 2,6-二氯苯酚吲哚酚脱色的方法通过使用还原后显色的四唑鎓染料进行了改进。(Brower 和 Woodbridge 1970;Nachlas 等人 1960)。

来自Cl 的酶。kluyveri 已被 Kaplan、Setlow 和 Kaplan (1969) 纯化和表征,他们使用与目前的 Worthington 产品等效的起始材料。

Worthington 克氏梭菌心肌黄酶的特性:

除非另有说明,以下数据来自 Kaplan等人。(1969 年)。

分子量:24,000

蛋白质登录号:Q97E86(丙酮丁醇梭菌)

组成:该酶每分子含有一分子黄素单核苷酸。氨基酸组成已确定。

J佳 pH 值:8.5。在 pH 7.4 和 9.4 时,活性降低了 50%。NADH 和 NADPH 都共享这个最优值。

常数:据报道,NADH 的 Km 为 9 X 10 -5,而 NADPH 则低得多。

抑制剂:N-乙基马来酰亚胺在浓度低于 5 mM 时使心肌黄酶失活。

活化剂:我们发现过量的黄素单核苷酸 (FMN) 似乎会轻微刺激与二氯苯酚-吲哚酚的反应。

特异性:NADH 或 NADPH 均可用作还原剂。然而,辅酶之间没有催化氢交换。氧和细胞色素 C 都不会被Cl 还原。克鲁维心肌黄酶。

稳定剂:NADH、NADPH 和 FMN 保护酶免受尿素和胍的变性。

稳定性:虽然具有合理的稳定性,但如果长时间保存,干酶应储存在冰箱中。尤其是溶液,应始终远离强光。

果胶酶  WBC-LS004298

蛋白酶 K, Recombinant, Solution  WBC-LS004258

碱性磷酸酶, Purified  WBC-LS004234

胶原蛋白酶, Type 1, Filtered  WBC-LS004217

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