Abnova丨Abnova GPCR单克隆抗体解决方案

GPCRs是人类最大的膜蛋白家族，负责感觉调节和细胞反应等功能，被认为是制药行业最有价值的药物靶点之一。 Abnova拥有强大、可靠、经济高效的蛋白质脂质体重组系统高通量平台和针对GPCR的单克隆抗体（Mab）的生产研究，以克服缺乏合适抗原生产高质量单克隆抗体的障碍。

通过优化脂质体存在下的无细胞蛋白质合成和通过非连续蔗糖密度梯度离心的纯化过程，合成了可溶性重组的GPCR蛋白脂质体抗原。 Abnova不仅能够生产适合功能分析的GPCR蛋白脂质体，而且还能生成具有敏感性、特异性和广泛动态范围的定制单克隆抗体。另外，以定制的GPCR单克隆抗体的高成功率也扩大了Abnova的领域，使Abnova也能提供针对各种膜蛋白的单克隆抗体。

蛋白脂质体表达的技术比较：

  传统的表达系统 双电层/透析技术 双层膜自动化系统

 稳定性 低 中 高

 溶解性 低 中 高

 产量 低 低 高

 多样性 低 中 高

 通透量 低 低 高

Abnova GPCR单克隆抗体实例介绍： 

图1：野生型DRD1的表面等离子体共振（SPR）分析

用SPR测定DRD1的配体结合活性，其中多巴胺和组胺被固定在测量细胞和参考细胞上，处于同一水平。野生型DRD1与多巴胺特异性结合，KD 值为0.7X10-6 M。

图2：抗DDD1小鼠血清的亲和力分析

采用Scatchard图结合ELISA对36株小鼠单克隆抗体的亲和力进行了评估。小鼠单克隆抗体的Kd值范围为从10-7 M到10-10M，其中一半的小鼠对DRD1表现出高度敏感性。

图3：GPCR小鼠血清的特异性分析

使用ELISA评估针对3种不同GPCR的小鼠单克隆抗体，包括GHSR（A类）、PTGER1（A类）和T1R1（C类）。所有抗GPCR单克隆抗体均显示出与预期目标抗原的特异性相互作用。

参考文献：

Takeda, H., et.al. (2015). Scientific Reports. DOI: 10.1038/srep11333

Goren, M.A. and Fox, B.G. (2008). Protein Expression and Purification. DOI:10.1016/j.pep.2008.08.002

Nozawa, A., et. al. (2016). Plant Cell Physiology. DOI:10.1093/pcp/pcm150