worthington组织解离指南——上皮组织&结缔组织

worthington包括两个大的方面：组织类型和解离酶。组织类型又包含上皮组织和结缔组织两个部分。下面一起来看看worthington组织解离指南的上皮组织&结缔组织。

1、上皮组织：

在成人中，上皮形成组织，例如表皮、皮肤的腺体附件、角膜的外层、消化道和生殖道的内层、腹膜腔和浆液腔以及血液和淋巴管（通常称为作为“内皮细胞”）。源自原始肠道外露的结构，包括肝脏、胰腺、垂体、胃和肠腺的部分，也由上皮组织组成。

上皮细胞通常紧密地堆积在一起，以至于它们之间几乎没有细胞间物质。相邻细胞之间存在J其紧密的结合，使得上皮的解离成为一个困难的过程。

在相邻上皮细胞的侧面，有四种不同类型的细胞间键：闭合小带、粘附小带、粘附黄斑和连接。前三者往往紧密相连，形成交界复合体。在zonula occludens或“紧密连接”中，存在多个相邻单元膜实际融合的位点，其间散布着大约 100-150 Å 的单元膜分离的短区域。在zonula 粘附，或“中间连接”，细胞质细丝的精细网络从细胞膜辐射到细胞质。相邻细胞的单位膜之间的空间约为 150-200 Å，由组成未知的细胞间无定形物质组成。在黄斑粘附或“桥粒”中，有一些类似的细胞内细丝阵列。相邻的单位膜空间约为 150-200 Å，由细胞外蛋白和糖蛋白基质组成，通常在其中可见电子密集条。桥粒的完整性需要钙，它被 EDTA 和无钙介质分解。胶原酶、胰蛋白酶和透明质酸酶也可以解离桥粒。关系_，或“间隙连接”，覆盖大部分上皮细胞表面。在这些区域，单元膜看起来紧密相连，仅相隔 20 Å。细胞间物质由无定形的深色物质组成。

在覆盖结缔组织的上皮基底表面上，有一个称为基底层的细胞外粘合层或薄片。薄层由嵌入高低分子量糖蛋白的无定形基质中的精细胶原状网状纤维网络组成。

2、结缔组织

结缔组织由间充质细胞发育而来，形成皮肤真皮、多个器官的囊和基质、神经和肌肉细胞和束的鞘、粘液和浆膜、软骨、骨骼、肌腱、韧带和脂肪组织。

结缔组织由嵌入无定形基质中的细胞和细胞外纤维组成，根据纤维的相对丰度分为松散或致密。这些细胞可以是固定的或游走的，包括成纤维细胞、脂肪细胞、组织细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、肥大细胞和间充质细胞。

存在三种类型的纤维：胶原纤维、网状纤维和弹性纤维，尽管有证据表明前两种可能只是同一基本蛋白质的不同形态形式。细胞、纤维和基质的比例在不同组织中差异很大，在发育过程中变化很大。

胶原纤维在几乎所有结缔组织中都以不同的浓度存在。它们的厚度为 1-10 µm，不分枝，通常呈波浪状，并包含定期重复的横向带。在生化方面，天然胶原蛋白是动物细胞外结缔组织、皮肤、肌腱、血管、骨骼等的主要纤维成分。简而言之，胶原蛋白由横向聚集的J化原胶原分子 (MW 300,000) 组成的原纤维组成。每个棒状原胶原单元由围绕单个轴缠绕的三个螺旋多肽α链组成。这些链在每三个位置具有重复的甘氨酸残基，并且富含脯氨酸和羟脯氨酸。氨基酸序列是起源组织的特征。原胶原单元在横向排列中均匀结合，反映沿分子的带电和不带电氨基酸，从而产生轴向重复的周期性。成纤维细胞和可能的其他间充质细胞合成原胶原亚基并将它们释放到细胞外基质中，在那里它们经过酶促加工并聚集成天然胶原纤维。羟脯氨酰残基的链间交联稳定了胶原复合物，使其更难溶解，并能抵抗大多数蛋白酶的水解攻击。随着年龄的增长，胶原纤维的丰度和交联程度往往会增加，从而使细胞分离更加困难。成纤维细胞和可能的其他间充质细胞合成原胶原亚基并将它们释放到细胞外基质中，在那里它们经过酶促加工并聚集成天然胶原纤维。羟脯氨酰残基的链间交联稳定了胶原复合物，使其更难溶解，并能抵抗大多数蛋白酶的水解攻击。随着年龄的增长，胶原纤维的丰度和交联程度往往会增加，从而使细胞分离更加困难。成纤维细胞和可能的其他间充质细胞合成原胶原亚基并将它们释放到细胞外基质中，在那里它们经过酶促加工并聚集成天然胶原纤维。羟脯氨酰残基的链间交联稳定了胶原复合物，使其更难溶解，并能抵抗大多数蛋白酶的水解攻击。随着年龄的增长，胶原纤维的丰度和交联程度往往会增加，从而使细胞分离更加困难。

网状纤维在疏松结缔组织中形成精细的分支网络。它们表现出与胶原蛋白相似的规则重复亚基结构，并且可能是上述典型胶原纤维的形态变体。网状纤维往往在年轻动物的组织中更为普遍。

弹性纤维不如胶原蛋白品种丰富。它们类似于网状纤维，因为它们在结缔组织中形成分支网络。单根纤维的厚度通常小于 1 µm，并且没有横向周期性。纤维包含嵌入在称为弹性蛋白的无定形物质中的纵向排列的微纤维束。与胶原蛋白一样，弹性蛋白含有高浓度的甘氨酸和脯氨酸，但相比之下，缬氨酸和两种不常见的氨基酸——桥素和异桥素的含量很高。成纤维细胞和可能的其他间充质细胞合成弹性蛋白前体原弹性蛋白，并将其释放到细胞外基质中，在此酶将赖氨酸残基转化为结素。弹性蛋白的聚合发生在后者的链间交联过程中。在这种状态下，

嵌入结缔组织细胞和纤维的粘性细胞外基质是各种糖蛋白的复杂混合物，最常见的是透明质酸、硫酸软骨素 A、B 和 C 以及硫酸角蛋白。这些糖蛋白中的每一种都是连接到蛋白质部分的两种不同交替单糖的无分支聚合物。例如，透明质酸含有乙酰氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸单体以及大约 2% 的蛋白质，而硫酸软骨素含有乙酰半乳糖胺和葡萄糖醛酸或艾杜糖醛酸单体以及超过 15% 的蛋白质。这些糖蛋白的相对丰度因结缔组织的来源而异。

worthington解离酶研究工具：

胶原酶

胰蛋白酶

弹性蛋白酶

透明质酸酶

木瓜蛋白酶

胰凝乳蛋白酶

脱氧核糖核酸酶 I

中性蛋白酶（分散酶）

胰蛋白酶抑制剂

无动物源 (AOF) 酶

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