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BrdU细胞增殖检测试剂盒化验原理

细胞周期和DNA合成的研究对许多科学领域都至关重要。传统上,放射性标记的胸苷被用于追踪新的DNA合成和细胞激增尽管相当敏感,但使用放射性标记的胸苷有以下局限性:管理、处理和处置放射性同位素,通常需要昂贵的检测设备。最近,胸苷类似物5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)被用来代替放射性标记的胸苷,并结合到新合成的活跃增殖的DNA链中细胞。在固定和部分变性细胞DNA后,可以检测到BrdU其允许分析活细胞新DNA合成。

BrdU细胞增殖检测试剂盒化验原理:

细胞选择™ BrdU细胞增殖ELISA试剂盒检测掺入细胞DNA的BrdU在使用抗BrdU抗体的细胞增殖期间。当细胞在含有BrdU,嘧啶类似物取代胸苷被并入新合成的DNA中增殖细胞(下图)。一旦去除标记介质,细胞就被固定,DNA就被用固定/变性溶液一步变性(需要变性DNA以改善并入的BrdU用于检测的可接近性)。然后是抗BrdU小鼠单克隆抗体加入抗体,然后加入HRP缀合的二级抗体以检测掺入的BrdU。显影颜色的吸光度大小与BrdU的量成正比并可与细胞增殖直接相关。

图:细胞选择示意图™ BrdU增殖ELISA

BrdU细胞增殖检测试剂盒相关研究:

1.CBA-240细胞选择™ 细胞活力和细胞毒性试验

2.CBA-081细胞选择™ 96井Anoikis分析

3.CBA-253细胞选择™ 细胞增殖测定试剂(比色法)

BrdU细胞增殖检测试剂盒套件组件:

1.1000X BrdU溶液(零件号125101):一个30µL小瓶10 mM BrdU。

2.抗BrdU单克隆抗体(零件号125102):一瓶10µL小鼠抗BrdU抗体。

3.固定/变性溶液(零件号125103):一瓶20 mL。

4.抗体稀释剂(零件号125104):一瓶50 mL。

5.二级抗体,HRP缀合物(零件号230003):一个20µL小瓶。

6.10X洗涤缓冲液(零件号310806):一瓶100 mL。

7.基质溶液(零件号310807):一个12 mL琥珀瓶。

8.停止溶液(零件号310808):一瓶12 mL。

相关文献:

1. Shoghi KI, Xu J, Su Y, He J, Rowland D, Yan Y, Garbow JR, Tu Z, Jones LA, Higashikubo R,

Wheeler KT, Lubet RA, Mach RH, You M.. (2013) PLoS One. 8:e74188

2. Gong F, Wang G, Ye J, Li T, Bai H, Wang W (2013) Oncol Rep. 30:2976-2982

3. Piastowska-Ciesielska AW, Kozłowski M, Wagner W, Domińska K, Ochędalski T. (2013) Arch

Med Sci. 30:739-744.

4. Liang XH, Li LL, Wu GG, Xie YC, Zhang GX, Chen W, Yang HF, Liu QL, Li WH, He WG,

Huang YN, Zeng XC. (2013) BMC Cancer 13:412

5. Imramovský A, Jorda R, Pauk K, Rezníčková E, Dušek J, Hanusek J, Kryštof V (2013) Eur J Med

Chem 68:253-259.

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