QuickTiter 逆转录病毒定量试剂盒测定原理

逆转录病毒基因转移是一种有效地将稳定的、可遗传的遗传物质导入大肠杆菌的技术任何分裂细胞类型的基因组。不能复制的逆转录病毒通常通过将逆转录病毒载体转染到包装细胞系中。逆转录病毒根据用于进入宿主细胞的受体。亲嗜性病毒可以识别仅在小鼠身上发现的受体和大鼠细胞。兼嗜性病毒识别广泛的哺乳动物细胞上发现的受体类型。

小鼠白血病病毒（MMLV）为基础的载体是基因中应用最广泛的逆转录病毒载体由于其能够将其转基因稳定整合到宿主染色体DNA中的能力较低免疫原性。通过覆盖病毒进行滴定以确定病毒滴度的方法连续稀释后上清液到靶细胞（例如NIH 3T3细胞）上被广泛用于表示

感染性病毒浓度为每体积菌落数（即每毫升CFU）。然而，该集落形成测定是耗时的（7天或更长时间）。此外，滴度由由于用于相同滴定方法的条件不一致，不同的基团可能会有所不同，例如靶细胞类型，靶细胞数量，聚阳离子（例如聚凝胺）浓度，孵育温度，和转导的暴露时间。

Cell Biolabs QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒不涉及细胞感染；相反，它专门测量纯化病毒或未纯化病毒的病毒核酸含量上清液样品（参见测试原理）。在未纯化的病毒上清液的情况下，试剂盒是特别适用于在转导步骤之前测定上清液滴度。该套件有检测灵敏度极限为1.5 X 109病毒颗粒（VP）/mL，足以满足中高滴度逆转录病毒样本。整个过程大约需要60分钟。每个试剂盒都提供足够的试剂执行20次测试。QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒提供了一种快速定量的有效系统病毒上清液和纯化病毒的逆转录病毒滴度。

Cell Biolabs QuickTiter™  逆转录病毒定量试剂盒定原理：

Cell Biolabs QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒套件组件：

1.QuickTiter™ 溶液A（部件号40020）：一根试管–200µL。

2.快速滴定™ 逆转录病毒溶液B1（部件号312001）：一根试管–800µL。

3.QuickTiter™ 逆转录病毒溶液B2（部件号312002）：一根试管–800µL。

4.QuickTiter™ 溶液C（2X）（部件号40023）：两个管-每个1.5 mL

5.CyQuant®GR染料（400X）（部件号105101）：一根试管–50µL。

6.QuickTiter™ 逆转录病毒RNA标准品（部件号312003）：一个试管–500µL，含200

µg/mL retrovirus RNA Standard