DNA中的5-甲基胞嘧啶(5-mC)通过在DNA甲基转移酶对胞嘧啶环的影响。这一过程已得到充分研究与基因表达的抑制相关。还观察到,在人类中,5-mC发生在各种RNA分子,包括tRNA、rRNA、mRNA和非编码RNA(ncRNA)。5摄氏度似乎在某些类别的ncRNA中富集,但在mRNA中相对缺失。5-mC水平在动物基因组中是可变的,从一些昆虫中检测不到的数量到大约0.1-占人类细胞总RNA的0.45%。大多数(83%)5-mC位点存在于mRNA中。在内部这些转录物5-mC似乎在蛋白质编码序列中被耗尽,但在5'和3’UTR。已知两种不同的甲基转移酶NSUN2和Dnmt2催化5-mC真核RNA的修饰。有强有力的证据表明RNA胞嘧啶甲基化影响调节各种生物过程,如RNA稳定性和mRNA翻译。此外,穹窿RNA中5-mC的缺失导致Argonaute相关小分子的异常加工可作为microRNA发挥作用的RNA片段。因此,vault ncRNA的加工受损可能与NSUN2缺乏相关的人类疾病的病因有关。
最近,在DNA中发现了一些新的修饰核苷酸,如5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)、5-甲酰基胞嘧啶(5-氟胞嘧啶)和5-羧基胞嘧啶(5-HaC)也有在人类和小鼠组织的RNA中检测到。这些修饰的核苷酸也被产生通过5-甲基胞嘧啶的反复氧化(一种由TET家族酶介导的反应)。
MethylFlash 5-mC RNA甲基化定量分析试剂盒(Fluorometric)包含 5-mC RNA 甲基化定量实验所需的所有最佳化试剂,可以使用任何物种的 total RNA 样品来进行实验,如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒等,无论是从培养细胞、新鲜或冷冻的组织、血浆/血清或体液等来源皆可适用。
Input Type: RNA
Research Area: RNA Methylation
Target Application: Amount Quantitation
Vessel Format: 96-Well Plate
100% Guarantee: 6 months
Products(Assays): P-9009-48 assays /P-9009-96 assays
准确和方便地检测5-mC对于识别和了解在各种生理和生理过程中RNA中发生的5-mC甲基化变化病理过程。目前仅使用基于色谱的技术,如MS-LC检测RNA中的总5-mC。然而,这些方法耗时且吞吐量低成本高。为了解决这个问题,EpigenTek开发了MethylFlash™ 5-mC RNA甲基化定量分析试剂盒。
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高敏感性 – 可从200 ng的RNA样品侦测到至低0.02%的5-mC RNA 修饰
专一性 – 高专一性抗体使用, 不会有其他unmethylated cytosine或 hydroxymethylated cytosine的交互辨识干扰
均一性 – 套组中皆附有positive和negative control
准确性 – 极佳的positive control设计可让您的实验数据达到如HPLC-MS分析实验的效能
弹性化 – 採用strip-well的microplate格式, 能依照实验需求来进行少量或是高通量实验
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