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无需额外验证,基于J2的双链RNA ELISA试剂盒

J2已被用于阐明抗病毒反应是如何启动的,病毒采取了哪些反策略来避免它们,并通过对病毒核酸复制位点进行超微结构定位研究来探索病毒生命(Welsch等人,2009&Knoops等人,2011)。J2也被推荐作为诊断工具,以检测未确定的病原体本质上是细菌还是病毒(Richardson等人,2010)。最近,J2也被用于监测体外合成的mRNA制剂中dsRNA的去除,这些制剂可能在基因治疗中具有潜在的用途(Kariko等人,2011)。J2已成功用于各种免疫捕获方法,例如ELISA中。

基于J2的双链RNA ELISA试剂盒 #KBBA56:

校准器范围:0 纳克/毫升 - 200 纳克/毫升

敏感性:~1.5 纳克/毫升

样品类型:细胞培养上清液和生物制剂

运输条件:2 - 8 摄氏度

检测方法:450 nm 比色法

用法:仅供研究使用

基于J2的双链RNA ELISA试剂盒检测原理:

KRIBIOLISA 双链 RNA (dsRNA) ELISA 采用定量夹心酶免疫测定技术。它基于使用两种双链RNA(dsRNA)特异性单克隆抗体,可以灵敏和选择性地检测dsRNA分子(>=40 bp),而不受其核苷酸组成和序列的影响。dsRNA (J2) 抗体预包被到微孔上。将样品和标准品移液到微孔中,并由捕获抗体结合。然后,将HRP(辣根过氧化物酶)偶联的抗dsRNA (K1)移液并孵育。洗涤微孔以去除任何非特异性结合后,将即用型底物溶液(TMB)添加到微孔中,颜色与样品中dsRNA的量成比例发展。然后通过添加终止溶液停止显色。在450nm处测量吸光度。

基于J2的双链RNA ELISA试剂盒检测程序:

使用前将所有试剂置于室温。强烈建议所有控件和示例应重复或一式三份运行。

在各自的孔中加入100ul制备的阳性对照/标准品和样品。

密封板并在 37*C 下孵育 120 分钟。

吸出并用洗涤缓冲液(4X)洗涤板1次,并通过在吸收纸上用力倒置板来吸干残留缓冲液。擦拭微量滴定孔外底部的任何液体,因为任何残留物都会干扰读数步骤。

向所有孔中加入100ul的dsRNA特异性K1检测:HRP偶联物。

密封板并在 37*C 下孵育 60 分钟。

重复洗涤步骤(4)。

在每个孔中加入100ul的TMB底物。

将微孔板在室温下在黑暗中孵育30分钟。请勿摇晃,否则可能会导致更高的背景和更差的精度。阳性孔应变成蓝色。

移出 100 ul 的停止溶液。井的颜色应该从蓝色变成黄色。11.用酶标仪读取450nm处的吸光度。

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