AP偶联试剂盒的应用示例和FAQ

AP偶联试剂盒背景：

碱性磷酸酶（ALP或AKP）是一种通过水解磷酸单酯来去除底物分子上的磷酸基团并产生磷酸和游离羟基，从而使相应底物脱磷的酶。这些底物包括核酸、蛋白质、生物碱等。去除磷酸基团的过程称为去磷酸化。碱性磷酸酶是一种可以与待标记分子结合的磷酸酶。当与适当的底物孵育时，它将产生具有彩色、荧光或发光衍生物的标记分子缀合物，该缀合物可以被检测和定量分析。AP通常用于偶联物中，以确定分子靶标的存在，并经常用于ELISA、Western印迹和免疫组化。由于较高浓度的无机磷可以竞争性抑制碱性磷酸酶的活性，因此免疫实验中不应使用富含磷酸盐的PBS等系统，否则会导致高背景，可以使用TBS和其他不含磷酸盐的系统。FlyLink™ AP标记试剂盒使用戊二醛作为交联剂，通过一步法将酶抗体蛋白的氨基与戊二醛的两个醛基结合。AP可以直接标记在蛋白质、肽和其他含有游离氨基的配体上。联轴器产品可在4°C下储存一个月。

AP偶联试剂盒：

Cat #: D-AKE110

Size: 100 μg x 3

Storage: Stored at 4°C for 6 months, protected from light

AP偶联试剂盒应用示例：

直接标记的一级抗体是有利的，因为它们消除了免疫测定程序中对二级试剂的需求，从而消除了应用中繁琐的额外培养和洗涤步骤。

图1:FlyLink示意图™ AP标签套件

适用样品：

标记生物分子，特别是蛋白质、肽和其他含有游离氨基的配体

AP偶联试剂盒FAQ：

Q1：由于抗体浓度低，反应体积超过了最佳偶联系统？

A1：如果浓缩后浓度仍低于2 mg/mL，则适当调整反应体积，但最终浓度应大于1 mg/mL。AP溶液与淬火液的比例应保持不变。

Q2：HRP分子的摩尔比只能在1:1到1:4之间？

A2：对于不同的分子，合适的摩尔比是不同的。对于抗体，我们建议它不应超过1:2。对于其他分子，你可以根据自己的要求尝试不同的口粮。

*该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。