蛋白质巯基亚硝基化(S-nitrosylation)是一种典型的氧化还原依赖的蛋白质翻译后修饰,这种修饰是一个非酶的可逆的过程,主要依赖于蛋白质与扩散性一氧化氮的接近度。正如一氧化氮水平被激素敏感性一氧化氮合酶严格调节一样,S硝基化也可以被激素调节。实际上,一氧化氮合酶刺激相互作用蛋白的S-亚硝化,依次交换S-亚硝基并将修饰转移到靶蛋白上的选择位点。在数百个实例中,S-亚硝化可以调节细胞蛋白的功能,通常通过酶活性位点中的功能性半胱氨酸的瞬时失活。受影响的酶类包括代谢酶,半胱氨酸蛋白酶,磷酸酶和离子通道。
鉴于S-亚硝化在细胞调节中的广泛作用,高效快速的S-亚硝化蛋白检测试剂盒就非常重要。S-亚硝基化蛋白检测试剂盒#10006518基于生物素转换原理,将-SNO转化为S-C-生物素,再通过检测生物素来表征-SNO。该试剂盒使用简单方便用时短,样品可直接用于WB检测,在Nature Cell Biology等高分杂志上有过引用。
当然,它的小伙伴S-nitrosylated蛋白检测相关试剂——如生物素标记的探针:S-nitrosylated (SNO) proteins结合探针P NATL ACAD SCI USA和Methods: A Companion to Methods in Enzymology等杂志上都有过引用。
Biotin-HPD是一种巯基反应性生物素化试剂,形成可逆的二硫键。它用于标记蛋白质半胱氨酸和其他含有巯基的底物。Biotin-HPDP也用于生物素开关技术中标记S-亚硝基化(SNO)蛋白质,将SNO基团还原为硫醇。标记有生物素的化合物与链霉亲和素偶联珠亲和地相互作用,荧光团、酶等。Biotin-HPDP与含有巯基的底物的相互作用很容易在ph6.5到7.5的缓冲液(如PBS)中进行。在抗生物素和底物之间形成的二硫键可以稍后被还原剂(如二硫苏糖醇)切割。
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