LCM（激光共聚焦显微镜）得到的假想病理

    现实中对活检组织进行病理组织学诊断，并将其作为确定诊断，由于取活检多少都会伴有出血，特别是对于肝硬化或者是服用抗凝药、抗血栓药等有出血倾向的病例，大多不能实施活检。而通过LCM的内镜检查，不需要活检就能取得病理组织图像（假想的病理），即可以观察到核或细胞的水平。

    1、通过LCM（激光共聚焦显微镜）得到的假想病理

   激光共聚焦显微镜作为一种非侵袭性检查手段，可以从未固定、未经过染色的标本中得到近似组织的图像，在临床上得以应用。到目前为止，已对食道、胃、大肠的病例成功地进行了LCM观察。

    用LCM观察大肠切除标本的典型图像如下图：

    LCM是用波长为488mm的氩激光作为照射光和观察光。通常LCM都用荧光色素进行观察，为了取得荧光，设计里能够切断激发光（照射光）的特殊的滤光器。但是本次研究并没有用荧光色素，为了得到从生物体表面来的反射光，除去了切断照射光的滤光器。

     用LCM切除的大肠正常粘膜或肿瘤性病变进行观察，并与日后病理组织切片（水平切面）的HE图像进行对比。在正常粘膜中，LCM并不能确认偏向基底膜侧的细胞核，但可看到杯状细胞呈低亮度，细胞质呈高亮度。在腺瘤和癌中细胞核表现为低亮度，而细胞质表现为高亮度像。在癌中用LCM能够确认出细胞核的概率高于腺瘤。这个可能取决于N/C比。另外，杯状细胞在正常粘膜和腺瘤中都呈低亮度图像。LCM图像和水平切面的HE图像相对应。

2、探头型LCM的原型（口径3.4mm）如图：

    这个系统中波长为405mm的激光，通过光纤的传导，经过光纤耦合器传达到探头的前端。从光纤发出的光，通过物镜集中成微小的光点。微小的光点通过探头前端设计的扫描机构进行二维扫描。由组织内扫描的光点发出的反射光，通过与发出光相通的路径，返回到光纤内。返回到光纤的光，在光纤耦合器处进行分割，被光检出器检查出来。从检查器出来的信号，以光点的扫描为基础进行复原，从而得到二维的图像如下图：

利用这项技术，可以成功地获得正常直肠粘膜体外观察的图像。但是，现实中在临床应用方面还存在以下问题：探头必须要和病变部位垂直，但是有些部位只能得到切线方向，因此观察比较困难。可以在内镜的前端装上透明帽，以改善探头固定困难的问题。

  3、共聚焦激光内镜（Optiscan公司）

    在内镜中搭载了与激光共脚垫显微镜同样的机能，可以清晰真实地观察到生物体内的病理组织学图像。已经有一部分应用于临床了，在静脉注射荧光色素标记钠后开始进行观察。视野区域500×500大，最大可放大到1000倍，从而能够清晰真实地得到高分辨率放大的细胞水平的数字图像。已经有大肠粘膜生物体内细胞诊断的报道了。