显微镜鉴定发情母犬最佳配种期

如何鉴定发情母犬最佳配种期

排卵时间的确定：母犬排卵多发生在上皮细胞角化程度最高的第一天，白细胞完全崩解消失成不规则的碎片。阴道黏膜细胞层增生，表皮细胞80%-------90%角化，核不明显。

 

    母犬发情在生殖激素的作用下，会出现一系列的发情征兆，比如阴部肿胀，阴道流出红色分泌物及其颜色会发生变化等等。如何判定母犬发情到什么程度为最佳配种时间，在实际工作中，方法也是多种多样；有根据发情天数来推断的；有根据公犬来试情的；有根据母犬阴道分泌物的量和颜色来确定的；还有的只是根据平时的经验来判断。根据试验结果发现，用母犬阴道分泌物涂片进行显微镜检查的方法来判断母犬最佳配种期，是一种既简便又准确的判断方法。

 

一）细胞学检查。阴道上皮细胞学变化与雌激素水平变化密切相关，检查应间隔24小时进行，并结合其他临床检查和生育史调查。采样时将犬固定于桌面上，使阴道保持水平，以两指分开阴门，用等渗盐水浸湿的棉球和细管采样。使用棉球采样时将棉球插入阴道后，转动着取出；使用细管采样时将细管插入子宫颈口后稍向后撤，挤出数滴等渗盐水，再将其吸入细管后取出。将采得的样品置于载玻片，用另一张载玻片推片，然后固定。

 

    染色后用普通显微镜检查，不染色者可用相差显微镜检查。发情前期上皮细胞有核，初期出现大量类基础细胞和中间细胞，并有白细胞和红细胞；后期类基础细胞、小型、中型细胞和红、白细胞数量减少，出现嗜酸性表皮细胞。

 

    发情开始阶段出现大量嗜酸性和嗜碱性表皮细胞和一些大中间细胞，并有少量无核细胞和红细胞；此期后期主要是嗜酸性表皮细胞、无核细胞和细胞碎片、白细胞和有核上皮细胞重新出现。发情后期仍有表皮细胞存在，类基础细胞和中间细胞增加；此期前10天白细胞增加，之后下降，20天后消失，泡沫细胞和发情后期细胞大量出现。在乏情期可见少量类基础细胞、中间细胞和白细胞，有时可见泡沫细胞。

应该注意，阴道细胞学检查并不能判定出现LH峰和排卵时间，但可据此推断周期阶段。

 

（二）血中孕酮测定。采用快速孕酮测定方法每周三次测定外周血中孕酮的浓度，可见在出现LH（促黄体素）峰时，孕酮浓度开始增加，开始排卵时，孕酮浓度迅速增加。用此方法可以比较准确地确定排卵时间，从而提高配种受胎率。由于目前尚无快速测定LH的方法，因此还不能通过直接测定LH来确定配种时

 

    

    母犬的阴道分泌物多是阴道上皮细胞，而上皮细胞又受卵巢内分泌直接影响，其成熟程度与母犬体内雌激素水平呈正相关。雌激素水平高时，涂片中有较多的角化细胞，核致密深染；雌激素水平低时，涂片中出现小而园或卵圆形，核疏松蓝染的底层细胞。因此，根据涂片中的上皮细胞的变化可以评价卵巢的雌激素水平。进而判定发情母犬最佳配种时间。

 

     发情前期：在发情前期的初期的涂片上，上皮细胞主要是副基细胞和小中间细胞，随后，副基细胞和小中间细胞逐渐减少，大中间细胞及角化上皮细胞的比例逐渐增加，偶见白细胞。    

 

     发情期：在发情期的阴道涂片上，观察到的主要是角化上皮细胞，根据角化的程度不同，有些角化上皮细胞还含有固缩的核，而另一些角化的上皮细胞核则完全消失。在发情期的末期，角化上皮细胞呈团块状或片状聚集，除角化上皮细胞外一般看不到其他细胞。

 

     发情后期；发情后期阴道涂片的主要特点为可观察到大量的白细胞。在发情期的早期，可看到小中间细胞及大中间细胞。而在发情后期的晚期，白细胞的数量减少，副基细胞的数量将增加，且有时还可观察到细胞碎片。

 

     泛情期；乏情期的阴道涂片上主要是小中间细胞及副基细胞，白细胞几乎不可见。