提醒
问
1、带壳的产品，比如牡蛎、扇贝等应如何均质？
答
标准规定，对菌落总数来说，一般牡蛎、扇贝是去壳取内容物和它的体液来检验；如果取样后有点碎壳或比如鸡爪产品取样后有碎骨，应该用旋转刀均质器而非拍打式均质器。
问
2、有一些样品倾注之后，平板的底部有白色沉淀和颗粒，长菌之后不好鉴别，请问老师有什么好的方法？
答
比如牛奶花生或奶酪这一类产品，均质后会有颗粒的干扰，很多人建议加入TTC来显示红色，以排除颗粒对菌落的干扰，但标准没有规定可以加TTC来显色。首选应考虑带有滤网的均质袋，并且倾注4个平板，其中2个去做培养，另外2个平板放冰箱保存48小时， 计数时将冰箱保存的两个平板的白点数作为本底扣除。
问
3、检测结果在检出限和定量限之间该怎么出报告呀？
答
检出限是方法能测出该物质时的最低浓度。
定量限是方法能准确定量出该物质时最低的浓度。
看你检测的标准怎么要求的，一般这种情况我认为报告“检出，小于定量限值”，检测值小于检出限报“未检出，小于检出限值”，大于定量限就直接报告数值。
问
4、如果样品和培养基发生反应怎么办？有没有这种情况？
答
有一些微生物能够分解测试片的凝胶，相当于极少数的微生物能溶解琼脂一样，这就是一种菌落蔓延，能够使琼脂液化，或测试片上的凝胶液化形成一个轻度蔓延的状态。
问
5、沙门氏菌的判定是以生化实验结果为主，还是血清学判定为主？
答
国标中规定得很明确，要先做生化鉴定，在生化鉴定的基础上进行血清学判断，不能说是哪一个为主，因为要是只做其中一项的话，会出现漏检或假阳性的情况。在日常检测中我们会发现一些非沙门氏菌的微生物也可能会有血清凝结的现象，比如柠檬酸杆菌。因此，要在生化鉴定证明菌落是沙门氏菌之后再做血清鉴定，两者综合起来去判断。
问
6、有没有哪位老师知道，用灭菌锅灭培养基的时候，培养基会在锅里溢出来，是什么原因呢？
答
a.打开压力没降到零位是主要原因 ；b.还有灭菌完成后泄压太快，引起培养基喷出来；c.可能是塞子透气不好，或者装太多了； d.培养基与瓶口之间的空间留的太少。
问
7、霉菌的直接计数法中，有没有标准的菌丝体图片可以参考？
答
标准中是没有给出图片的，但是我们日常检测中也积累了一些数据，菌丝体是透明的，呈现树枝状，图片如下。
问
8、做致病菌的时候，是不是每次实验都要做阴性对照？
答
国标中未明确提及必须做阴性对照，但是做了可避免出现漏洞。阳性质控是要做的，比如做沙门氏菌的检测，要用肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌做阳性质控。
问
9、大肠菌群的MPN法，单料双料怎么选择？
答
根据产品标准中大肠菌群的限量选择单料还是双料。比如说产品标准限量中大肠菌群小于0.92，就要用双料去培养；如果产品标准限量中大肠菌群小于9.2，就用单料去培养。
问
10、在无菌室进行微生物检测时，从检样开始到最后的确认，哪些环节必须要用酒精灯，哪些环节可以不用？
答
酒精灯的作用是通过酒精燃烧形成向上挥发的气流，使酒精灯周围形成一个无菌的环境。在无菌室的净化工作台上操作时，由于工作台有垂直气流，气流经过高效过滤器进入柜体内部就会形成一个无菌的环境。因此，只要开启风机，柜体内部就是一个无菌的操作环境，不需要使用酒精灯。在涂片和染色的时候会用到酒精灯。
问
11、根据4789.2-2022，菌落总数根据风险评估可以只做一个稀释度，那么大肠菌群是不是根据风险评估也可以只做一个稀释度？
答
如果做MPN法的话需要三个稀释度；如果做平板法的话，只做一个稀释度肯定不符合现行标准，相当于长期偏离，是有问题的，除非标准做了修订。
问
12、CNAS标准CL01-A001规定的生物安全柜定期检查了，具体要检查哪些项目？
答
可直接联系第三方机构，依据生物安全柜相关行业标准里面的项目进行检测。
问
13、如果没有阳性菌种可以用其他什么方法来验收培养基吗？
答
标准里规定了实验室必须保存有满足实验需求的标准菌株或者是菌种，实验室有条件的话尽量配备一下。但是GB 4789.28正在修订，新增了一条，就是说可以用第三方的外检报告来验收。不过新修订的标准现在还没有实施。
问
14、GB 4789.2-2022可以厌氧培养吗？
答
这个不行，因为它主要适用的是嗜中温需氧菌。
问
15、移液管的头部一定要用棉花塞住吗？
答
用棉花塞住移液管的头部主要是为了防止洗耳球用力过大的时候把液体吸到里面，但是它会导致吸液比较慢。如果不放棉花的话也可以，要求操作洗耳球的时候力度适中，没要求必须塞棉花。
问
16、包装材料表面的取样及操作方法？
答
市面上有售5cm×5cm或者10cm×10cm的规格板，把规格板消毒灭菌后框到包装材料上，用棉棒或海绵擦拭，放到稀释液里，参照菌落总数的检测流程进行检测。
问
17、根据GB 4789.2-2022,可以使用一天出结果的快速测试片吗？
答
客观的讲，如果是第三方实验室，不建议用快速片作为GB 4789.2-2022的方法出具结果。如果是企业实验室想用快速测试片放行自己的产品，通过严格的验证之后，是可以用的。何老师验证过一些快速测试片，目前数据可能还没有想象的那么好，但是如果企业实验室验证过食品基质是适合的，就可以用。
问
18、企业采用测试片方法，一定要做验证吗？要和平板法对比吗？
答
个人建议最好去做验证。因为很多企业没有保存标准菌株，日常做不到对培养基包括测试片的验收，如果不做测试片法与平板法的比对，企业怎么知道测试片好不好？对于企业来说，可以连续验证一段时间，觉得数据可靠性在可接受范围之内，就可以放心用。
问
19、调制乳、灭菌乳、酸性乳饮料、碳酸饮料这些算是一种基质还是不同基质？
答
虽然原则上这些产品都是液体样本，但是碳酸饮料属于偏酸性的，还溶有气体，如果是食品企业，建议每个产品独立验证。如果是第三方企业，建议验证检测频率最高的样本；但是正式采用测试片前，头几个批次建议平板法和测试片法同步测试进行比较。
问
20、用倾倒法、测试片法和平板涂布法检测植物营养液时，三种方法结果差异比较大，不在一个数量级，原因是？
答
要了解到植物营养液的具体成分（包括是否含有抑菌成分）、采用方法的具体操作流程以及具体的实验结果，具体问题具体分析。
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