免疫实验中其实本无“二抗”

昨日某大学一初入免疫学实验室同学询抗猪IgM二抗，不想小师妹以为小福只想多卖产品故意欺骗她：“我要的是二抗，不是单抗！”

今天小福就给大家讲讲什么是一抗什么是二抗。

在百度百科，我们查到:

“一抗体就是能和非抗体性抗原（特异性抗原）特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。二抗体是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。”

在免疫学实验中，通常我们检测某个物质（也就是抗原），需要先加入抗-抗原的抗体（primary antibody）,再加入抗-Primary Antibody的抗体（Second Antibody），通常这个Second Antibody上标记一个酶或者荧光素什么，这些酶和荧光素是作为信号呈现的；因为大部分实验都是这样一个构架模式，所以这个一抗，二抗这个名字就是这么来的，这个名称也非常便于表述，但是在比较正规的文献中大家一般看不到一抗二抗的字眼，一般会这样表述：比如我们用western blot 检测GAPDH,一抗会表述为：mouse anti-GAPDH monoclonal Antibody,二抗会表述为：HRP Conjugated Goat anti-mouse Igs antibody。

再理一下：通常这个所谓的二抗的“二”，是由于它是抗-抗体的抗体，所以才称它为“二”；这个抗-抗体的抗体也可以是单抗，这个应该可以诠释那位同学的疑惑吧。

如果在上述的实验中，我们要检测的抗原是免疫球蛋白（抗体），比如，检测抗原human IgG1 Antibody ,实验构架可能是这样的：首先加入的抗体为Rabbit anti-(human IgG1 antibody),再次加入的抗体可能为HRP Conjugated Goat anti-(Rabbit Igs Antibody) antibody。

这里谁是二抗谁是一抗是不是有点晕头？其实在有些实验中不一定非要指出谁是一抗谁是二抗，只需要回忆回忆猴子捞月亮的故事，后一个抗体抓住前一个抗体的“尾巴”，最后一个抗体把酶或者荧光素连起来，让检测信号可以高信噪比呈现这就完事了。

当然，能够在免疫实验系统中一个抓另外一个“尾巴”的不仅仅是抗体，准确的说应该叫Binding Reagent，这里面大名鼎鼎的就是生物素系统-链霉亲和素系统，这个很多时候比二抗还好用，但是必须首先对一抗进行生物素标记。