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Frdbio HRP标记试剂盒
适用范围:
本试剂盒适用于带有游离氨基的物质的标记,比如:带有游离氨基(伯胺)的小分子化合物,蛋白或者抗体。
产品简介:
本试剂盒原理:采用改良的碘氧化法活化辣根过氧化物酶(HRP),经过氧化以后活化的HRP可以与待标记物的游离氨基结合,发生希夫碱反应(Schiff's base reaction).
储存条件:
该试剂盒在低温下运输,收到后请置于-20℃保存,保存时间18个月。
产品使用方法:
1. 标记前准备:
从-20℃中取出HRP标记试剂盒,室温条件下平衡30分钟,使各组分充分解冻后混匀。此时准备待标记物:待标记物以0.01M pH7.4PBS为佳,不含有甘油、叠氮钠、氨基物质(包括甘氨酸、Tris等),EDTA等物质。如果待标记抗体含有以上物质,需用0.01M pH7.4PBS缓冲溶液进行充分透析或者超滤管超滤以除去以上物质保证标记效率;调整待标记物的浓度至适当的浓度,抗体调整的浓度为0.5-5mg/mL;对于小分子物质需要实验者摸索浓度,保证HRP的比例过量,如果不能确保HRP过量的话,标记完之后最好透析或者过滤除去未标记的小分子物质。
2. 标记反应:
向待标物的溶液中加入1/10体积的标记反应液,用移液枪反复吹打几次以充分混匀,避免产生气泡;将以上待标记溶液加到辣根过氧化物酶管中,用移液枪反复吹打几次以充分混匀,避免产生气泡,室温避光反应3 小时。
3. 标记反应终止:
将反应终止液干粉管中加入1mL去离子水配成反应终止液,取适量的反应终止液加入步骤2的反应液中,比例为:每10μL反应液加入1μL反应终止液。充分混匀,室温放置1小时。
4. 标记物产物收集与保存:
终止完成后,加入等体积的标记物保存液,充分混匀,置于-20℃保存。
附表:抗体标记用量参考表(本表仅做参考)
产品编号HRP酶量可标记抗体量最佳反应体积
ARL0010-500500 μg500 - 2000 μg500 μl
ARL0010-10001000 μg1000 - 4000 μg1000 μl
ARL0010-50005000 μg5000 - 20000 μg5000 μl
声明:本表只做参考,具体还是需要实验人员根据实际情况摸索条件。
*本试剂仅供实验室研究使用
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