上期答案
1:E
2:A
3:C
万众一心 抗击肺炎
中 / 国 / 加 / 油
上期题目回顾:
1.新冠病人出院指标监测病毒核酸RNA,以下哪种样本类型较适合临床:
A: 鼻咽拭子,B:肺泡灌洗液,C: 大便标本,D: 痰液,E:多种样本类型综合判断
2.该患者是否有必要进行新冠抗体IgG和IgM分型检测?
A:是,B:否,C:无所谓
3.新冠病毒核酸RNA提取,柱提和磁珠法提取如何选择?
A:柱提法更优,应选择柱提法,B:磁珠法更优,应选择磁珠法,C:两种方法无差异,应根据标本量和实验室具体情况选择适合的提取方法,D:无所谓
一
由“严重急性呼吸综合征冠状病毒2”(SARS-CoV-2)引起的2019年冠状病毒病肺炎(COVID-19 )造成了全球重大公共卫生事件。目前,各种标本类型阳性检出率及转阴时间不尽相同,华西医院实验医学科分子诊断团队对疫情期间就诊于本院的新冠疑似患者的各种标本类型(咽拭子、鼻拭子、痰液、粪便、尿液、血液、肺泡灌洗液、结膜分泌物、胸水、脑脊液等)进行研究,各种标本类型的阳性率各不相同,如表1.
华西医院分子诊断团队最终将11名患者纳入样本转阴时间的研究。咽拭子、鼻拭子、痰液、大便样本在患者住院期间持续监测直至全部样本转阴。最终得到结果如图1所示。
将首次出现相关症状定义为第一天,同种类型样本连续检测两次阴性视为转阴,连续两次检测阴性中将第一检测阴性的时间定义为转阴时间。同一类型样本中,若转阴后再次出现检测阳性定义为复阳。平均转阴时间鼻拭子样本最长,咽拭子样本最短,但四种样本类型之间差异无统计学意义。鼻、咽拭子、痰样本的复阳率均较高(大于>15%),不适合将连续检测两次阴性定义为转阴标准。大便标本虽然未发现复阳病例,但大便标本转阴后,仍有其他类型样本阳性。综上所述,应结合多种样本类型判断患者是否核酸转为阴性。所以对新冠出院病人的出院指标监测时,应多种样本类型同时监测以综合判断患者是否具备出院标准。
二
人体感染新冠病毒后会产生IgM或IgG抗体,检测血清中这些特异性抗体,可以判断被试者是否曾经感染病毒。当总抗体检测阳性时,我们有必要进行新冠IgM抗体和IgG抗体分型检测,因为机体被病毒感染后,血液中最早会出现IgM抗体,然后出现IgG抗体,IgG的滴度会有一个持续增高的过程,IgG滴度恢复期较急性期有4倍以上增高,并在血液中存在较长的时间;而IgM和IgG会共存一段时间后,IgM的滴度会逐步下降至消失。因此,通过抗体分型检测并根据IgM和IgG的阴阳性组合模式,可以判断患者是“近期”感染还是“既往”感染。尤其是当核酸检测为阴性时,如果是真正的病毒感染者,IgM/IgG抗体会出现一个此消彼长的过程,通过多次(2次以上)动态检测患者的IgM/IgG抗体,是可以明确新冠病毒感染诊断的。
三
华西医院分子诊断团队还研究了不同核酸提取方案对咽拭子样本检测的影响。 使用两种方法(磁珠提取法和滤柱提取法)同时从每个样品(n = 60)中提取病毒RNA。比较这两种方法的提取效率,它们的平均Ct值分别为34.99±4.27和35.23±5.64(表2),两者之间没有观察到统计学差异,p值为0.325。
目前华西医院所用的磁珠提取法与柱提法并无统计学差异,因此选择提取方法时,应根据样本量和实验室具体情况选择合适的提取方法。在有条件的实验室,在选择提取方法时,最好提前做一些方法比对,以确保所选方法的有效性。
巫丽娟,四川大学华西医院实验医学科分子诊断室,硕士,主管技师。主要从事临床分子诊断、本科生教学及科研工作,目前负责四川省卫计委课题项目一项,参研省科技厅项目两项,以第一作者发表中英文论文7篇。主要研究方向感染性疾病的分子诊断及分子诊断在移植配型中的应用。
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