名老中医魏长春验方“补脑汤”口服液研制

目的:对药方中中药材和提取物进行基源鉴别,建立质量标准;通过正交试验优选水提醇沉条件,优选药用辅料配伍配比,确定“补脑汤”口服液的制备工艺;建立“补脑汤”口服液的定性定量质量标准;考察“补脑汤”口服液的稳定性;研究“补脑汤”口服液对小鼠睡眠的影响,进行药效试验。方法:(1)利用苯酚-浓硫酸法测定

黄精、玉竹、决明子三种提取物的多糖含量。针对川芎,对醇溶性浸出物含量进行测定,利用高效液相色谱法(HPLC)测定指标成分阿魏酸的含量;利用薄层层析色谱法(TLC)进行定性鉴别;利用药典中的方法进行水分含量测定,总灰分及酸不溶性灰分测定。(2)以总多糖含量为指标,选取加水量、乙醇体积比、醇沉时间三个因素设计正交试验,绘制标准曲线,选择最佳水提醇沉条件。以口服液样品的外观和性状为观察指标,选择合适的表面活性剂等辅料和搅拌时间。(3)以TLC法建立药材定性鉴别标准,以总多糖含量、阿魏酸的含量为指标初步建立含量测定标准。(4)用高温试验、加速试验和常温留样试验共同考察“补脑汤”口服液的稳定性。(5)通过小鼠的直接睡眠试验、延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间试验、阈下剂量戊巴比妥钠小鼠催眠试验、巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期试验和对睡眠剥夺大鼠脑内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)影响这五个试验,考察“补脑汤”口服液对试验动物睡眠的影响。结果:(1)结果表明本课题涉及的提取物以及川芎药材符合药典相关规定。(2)优选的水提醇沉条件为:加水量是提取物质量的20倍,乙醇体积浓度60%,醇沉周期为24小时。选择泊洛沙姆188作为表面活性剂,用量为1%;高速搅拌15分钟。矫味剂选用甜度高、热量低的甜菊糖作为主矫味剂,甘露醇辅助调味。防腐剂选择了普遍使用的山梨酸钾,用量为0.1%,无菌配液。(3)按照以上优选工艺制得“补脑汤”口服液,性状为略带有中药芳香气味的棕色透明液体,味甜微涩,无沉淀和悬浮物。相对密度1.26,pH值在规定的4.5-6.5范围内。原料定性鉴别符合相关规定,多糖含量为131 mg/mL,阿魏酸含量为0.197 mg/mL。(4)高温试验、加速试验和常温留样试验的结果表明:口服液样品无析出和沉淀产生,外观性状稳定性良好;原方汤剂在高温试验第5天开始出现颗粒状沉淀和浑浊,在加速试验中第3个月开始出现颗粒状沉淀和浑浊,在常温留样试验中第3个月开始出现颗粒状沉淀和浑浊。高温试验中,第10天口服液的多糖含量、阿魏酸含量分别为第0天的102.80%、99.42%;原方汤剂的含量分别为第0天的76.24%、85.78%。加速试验中,第6个月口服液的多糖含量、阿魏酸含量分别为第0天的98.93%、99.07%;原方汤剂含量分别为第0天的65.56%、81.23%。常温留样试验中,第12个月口服液的多糖含量、阿魏酸含量分别为第0天的96.51%、97.88%;原方汤剂的含量分别为第0天的41.35%、64.48%。可以看出口服液样品在稳定性和有效成分保留方面均优于原方汤剂。(5)动物试验结果表明“补脑汤”口服液能够明显延长注射戊巴比妥纳小鼠的睡眠周期,明显提高注射阈下剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠发生率,显著缩短注射巴比妥钠小鼠的睡眠潜伏期,明显降低睡眠剥夺大鼠前脑组织中iNOS活力,具有统计学意义。结论:本课题优选工艺,制备了一种“补脑汤”口服液,并建立质量标准,进行了药效学研究。该口服液相对原方汤剂而言,具有储存、运输、服用方便,质量标准提高、稳定性好、成分保留更长久、有效期长,安神、改善睡眠的药效显著等优点。为进一步中试研究,产业化奠定基础。...