冻存复苏后细胞免疫学特性的变化 中科博生

  

具中科博生研究表明，细胞在冻存复苏后存在着一定的免疫学特性改变,这已被科学实验及临床实践证实。

小鼠骨髓在-196℃保存后,移植给同系的照射受体。动物 30d存活率为37.5%(15/40),略高于新鲜骨髓移植组（存活率为27.3%,15/55)。冻存小鼠骨髓混合后进行同种移植,动物30d存活率为75%,明显高于新鲜骨髓移植组(20%,p<0.02)。其原因可能是冷冻保存改变了细胞表面受体的特性,因此异体干细胞不相容的危险性降低,在临床则表现为免疫排斥反应减轻。中科博生。

淋巴细胞是机体防御体系的一个重要组成部分,它组成了特异性机体免疫的细胞免疫和体液免疫。因此对淋巴细胞冻存前后的比较，可以反映冻存对细胞的免疫学特性的影响。

（1）对淋巴细胞膜表面标记物的影响

人的B淋巴细胞带有可检测的免疫球蛋白（Slg)、补体受体C3和lg受体;T淋巴细胞则具有与羊红细胞（SRBC)形成花结的能力。Strong于1975年报道,采用荧光标记的兔抗人免疫球蛋白来标记SIg,并用荧光标记后的热源分lgG标记 Fc受体,结果表明,淋巴细胞冻存3个月后,它们的Fe受体和 Slg对低温是稳定的。进一步说明这些膜表面标记是能够抗冷冻损伤的。中科博生。

（2）对淋巴细胞转化的影响

淋已细胞能对许多有丝分裂原起反应,并向淋已母细胞转化。这种转化率、方面可以反映细胞的DNA 合成能力;另一方面可以作为各个淋巴细胞亚群收我学的指标。Oldham报道,人淋巴细胞经过一196℃冻存解冻后,对PHA（植物凝集素)、ConA （刀豆素 A）、PWwM（商陆促分裂原）的反应能力均在85%之上。Strong将小鼠淋巴细胞冻存于-8o℃冰箱,复苏后对PHA的反应能力为冻前的64%,但对LPS(细菌内毒素）的反应无影响。中科博生。

（3）淋巴细胞免疫反应力的改变

实验证实,淋巴细胞在冻存后其免疫反应力较冻前减别。以正细胞和肿瘤细胞作为靶细胞,结果冻存的淋巴细胞对正常细胞的攻江能刀较新鲜淋巴细胞弱;对肿瘤细胞的毒性无变化。中科博生。

（4）对淋巴因子释放的影响

用有丝分裂原或抗原激活的淋巴细胞能够释放一系列淋已囚'白～ 因于释放能力的检测比较,也可以反映细胞冻存前后免疫功能的变化。中科博生。

在造血干细胞移植过程中,必须获得足够的具有免疫功能的造血十细胞、只有这样才能使免疫造血功能重建。这些细胞对于移植的成功和宿主的抗感染能力的提高有着重要的意义。而成功移植的细胞多源于冷冻保存的造血十细胞、所以冷陈对免疫造血干细胞及免疫活性细胞的影响越来越受到重视。中科博生。

研究表明,冷冻可以影响免疫活性细胞如淋巴细胞的数量及细胞因子的分泌。Venkataraman等报道,用LPS诱导的经过冷冻的MNC(单个核细胞)培养的上清液中,比未经过冷冻的MNC培养上清液中的IL-1、IL-2、IL-6、INF-γ、TNF-α含量明显增加。另外,将冷冻的 MNC与未冷冻的 MNC混合培养,产生的细胞因子比预期的要少,说明正常培养的 MNC中混有抑制细胞因子产生的细胞存在。冷冻使抑 |制性T淋巴细胞活性降低,从而使其他类型的细胞产生细胞因子增加。中科博生。

细胞因子增加对于移植的成功具有重要的意义；血液肿瘤疾病患者在接受大剂量化疗后,通常于疾病缓解期接受造血干细胞移植,如果能够使回输的造血干细胞中携带有大量的细胞因子和白细胞介素,就能够帮助患者渡过术后的易感染期,降低肿瘤的复发率。

中科博生期待大家一起探讨学习。