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以pEGFP-C1图谱为例,我们在Addgene/Snapgene等网站获取载体序列信息,其中有两大类,一类是序列文件,不过序列文件有弊端是不能直观表现载体元件信息,另外一类是图谱文件,虽然无法编辑不可知位点序列,但是比序列文件的可视化要强很多。所以今天介绍两种如何将序列文件转化成图谱文件的方法给大家。
序列文件不能直观表现载体元件信息。
首先打开DNAMAN软件,选择新建,在新弹出来的对话框中输入序列,同时进行选定;然后再点击通道,在选择菜单栏中的序列加载序列,从选择中进行序列加载,就可以将序列导入到通道中!
点击菜单栏中的酶切位点分析。
再在弹出的页面中进行设置,绘制一个载体图谱中有2个必选项,其中一个是绘制限制图谱,另外一个是设定DNA为环状,这样显示出的就是一个环状的带有酶切位点标记的图谱。
在其他选项中,包括显示剪接、列出酶切位点……再点击下一步。
这个是提示我们应该选择那些酶,筛选需要使用的酶,然后点击完成。
最后生成图谱,其中上方是酶切位点谱图,下面是序列显示,其中具体在什么位置上,可以用酶将它切开。
双击图谱,添加元件,点击菜单栏第二项,最后点击New,即是添加一个元件。
设置添加元件的显示类型、位置、图例,最后点击OK,这里我们添加了2个元件。
添加完成后,可以看到图谱中,除了酶切位点后,还有我们添加的元件,点击右侧菜单,调整谱图中心位点位置,然后拉动图谱缩放,使字体不再重叠。
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