消毒后内镜“滤膜法采样”的那些事儿

作者：青海省人民医院刘迪
审校：冶挺
编辑：高少卉

导读：

内镜消毒质量监测的目的是最大限度地发现可能存在的危险。按照《软式内镜清洗消毒技术规范》（WS507-2016）要求，消毒内镜应每季度进行生物学监测，监测采用轮换抽检的方式，每次按25%的比例抽检，监测方法应遵循GB15982的规定，消毒合格标准为菌落总数≤20 CFU/件，且不能检出致病菌。不同的采样方法有其特点，传统采样法操作简便、不需要特殊的设备，但阳性率较低，在新规范中已经被滤膜法所取代。滤膜法采样敏感性高，但成本贵、需要专用采样设备。在此，我们再次给大家说说消毒后内镜的“滤膜法”采样。

规范怎么说？

按照我国《医院消毒卫生标准》（GB 15982-2012）附录A 中A.5.3.3的要求，消毒后内镜的采样及检查方法为：

“取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50mL含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集(可使用蠕动泵)送检。将洗脱液充分混匀，取洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数(CFU/件)。将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜(0.45μm)过滤浓缩，将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上(注意不要产生气泡)，置36℃士1℃温箱培养48h，计数菌落数。

当滤膜法不可计数时，菌落总数（CFU/件）=m（CFU/平板）×50，m为两平行平板的平均菌落数。

当滤膜法可计数时，菌落总数（CFU/件）=m（CFU/平板）+m1（CFU/滤膜），m为两平行平板的平均菌落数，m1为滤膜上菌落数。”

什么是滤膜法？

滤膜法是使用真空泵负压抽滤，在滤杯内的灭菌微孔滤膜上下面产生压差，使滤杯内的洗脱液由于压差作用通过灭菌微孔滤膜，使得微生物被拦截在灭菌微孔滤膜上。规范中要求使用孔径0.45μm（微米）的滤膜，可拦截直径0.45μm（微米）以上的微生物（绝大多数细菌的直径大小在0.5μm ~5μm（微米）之间），从而高效地拦截微生物，更准确地监测消毒内镜的清洗消毒工作。

滤膜法消毒内镜检测要用到什么试剂耗材？

含相应中和剂的洗脱液、蓝盖丝口瓶、真空抽滤装置、0.45μm（微米）滤膜。

（1）含相应中和剂的洗脱液”是：

醛类消毒剂用甘氨酸浓度为1.0%的洗脱液，其他消毒剂用硫代硫酸钠浓度为0.3%的洗脱液。

（2）真空抽滤装置和微生物检测仪大约长这样：

（3）0.45μm（微米）滤膜大约长这样：

为什么要用滤膜法？

由于内镜独特的结构和工作特点，清洗消毒工作存在一定的难度，国内外都出现过内镜引发患者交叉感染的案例报道。国内有研究显示[1-3]，采用滤膜法检测的样本合格率低于传统采样法，其原因包括50mL洗脱液能够比10mL洗脱液更充分地接触到消毒内镜的内表面，滤膜过滤时能够将洗脱液中的微生物高效拦截且对微生物的损伤较小，利于微生物的培养，得到更准确的菌落计数结果。因此，滤膜法能够更加灵敏、可靠地评价内镜的清洗消毒工作，更进一步保护内镜检查患者的安全，提高医疗质量。

以下视频为清洗消毒后胃镜微生物检测的主要步骤，

希望对大家“消毒内镜滤膜检测法”的学习有所帮助：

视频中主要采样设备：内镜监测取样泵，一次性集菌器，微生物监测仪由温州图旺生物技术设备有限公司生产并提供。有需要进一步了解该设备的老师可以与他们联系。联系人：周日仙 188 5772 7737

小调查

参考文献：

[1]黄茜莎,刘波,张翔,杨悦,张卫红,张永祥,陈文森,王培红,李占结.滤膜法与涂抹法检测内镜清洗消毒效果及成本比较[J].中国感染控制杂志,2019,18(06):571-576.

[2]纪学悦,费春楠,宁培勇,刘军,刘贺,宋佳.泵辅助采样与传统采样法在内镜消毒质量监测中的效果比较[J].中国内镜杂志,2019,25(05):65-70.

[3]朱艳秋,张满,杨怀,刘玮,薛婷,牟霞.滤膜法与倾注法两种方法检测内镜消毒效果的结果比较[J].中国感染控制杂志,2018,17(06):539-542.

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