刘师伟,段瑞雪,张佳新,李欣,吴亚茹
郭胜慧,汪湄湄,申竹芳,袁涛,傅葵
目的:观察内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂是否通过胰岛素受体底物→磷脂酰肌醇3羟激酶→蛋白激酶B→葡糖转运蛋白信号通路改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗。
方法:以棕榈酸培养3T3-L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗模型,分为棕榈酸组、棕榈酸+100ng / ml内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂组、棕榈酸+200ng / ml内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂组、棕榈酸+400ng / ml内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂组及棕榈酸+400ng / ml内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂+渥曼青霉素(磷脂酰肌醇3羟激酶抑制剂)组。运用2-脱氧-H3-D-葡萄糖掺入法及葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法分别检测细胞葡萄糖摄取和消耗量。以RT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测胰岛素信号通路中、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1、蛋白激酶B、磷酸化蛋白激酶B和葡糖转运蛋白-4的信使核糖核酸和蛋白表达水平。
结果:与棕榈酸组相比,随着内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂浓度增加,葡萄糖摄取和消耗量逐渐增加(P < 0.05),胰岛素受体底物1和蛋白激酶B的信使核糖核酸和蛋白磷酸化水平逐渐上升(P < 0.05),酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1/胰岛素受体底物1、磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B比值逐渐增加,同时葡糖转运蛋白-4的信使核糖核酸和蛋白表达也相应上调(P < 0.05)。与400ng / ml内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂干预组相比,棕榈酸+400ng / ml内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂+渥曼青霉素组葡萄糖摄取和消耗量降低,胰岛素受体底物1和蛋白激酶B的信使核糖核酸和蛋白磷酸化水平下降(P < 0.05),酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1/胰岛素受体底物1、磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B比值下降,且葡糖转运蛋白-4的信使核糖核酸和蛋白表达下调(P < 0.05)。
结论:内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制剂通过激活胰岛素受体底物→磷脂酰肌醇3羟激酶→蛋白激酶B→葡糖转运蛋白胰岛素信号通路,改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗。
作者单位:山西医科大学附属山西大医院;山西医科大学附属太原市中心医院;山西医科大学研究生学院;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院;中国医学科学院北京协和医学院
通信作者:刘师伟(lswspring6@aliyun.com)
原文参见:中华临床营养杂志. 2018;26(4):235-240.
联系客服