李莫愁说
武侠世界中的侠客们是不能在外面吃东西的,因为不是菜里有毒,就是仇家赶到,携手怒砸小饭馆。您要想补充点优质蛋白,要么找张三烤鱼,要么寻洪七公炖叫花鸡。想坐下来享受三斤已经高温蛋白变性的熟牛肉五斤18%的女儿红?take away吧~寻找蛋白真的这么难?
没错,寻找蛋白就是这么难!还记得莫愁读博时和团队小伙伴转一个质粒到感受态细胞里然后破碎细胞,分离纯化该质粒表达的蛋白酶。都已经做到最后一步了,但蛋白电泳一直没有出现目的条带……百思不得其解,浪费了一个周的时间重新纯化后,面对着除了marker以外空无一物的凝胶,莫愁决定把质粒送测,测序结果出来以后老师告诉我他拿错了质粒……
那么现在问题来了?当时的这一个多月莫愁到底在做什么……never mind!重要的是,莫愁的一位师兄竟然花了几十个月来纯化一个蛋白!想知道那几十个月到底发生了什么,赶紧跟随莫愁来独家揭秘!在这里也要感谢徐亦迅对采访稿的整理!
姜学军教授,现任职于美国Memorial Sloan-Kettering Cancer Center和康纳尔大学医学院。其实验室的研究主要集中在:(1)程序化细胞死亡(凋亡和铁死亡)的分子机制及其在疾病中的作用; (2)细胞自噬的分子机制及其在细胞死亡和癌症中的作用;(3)肿瘤抑制基因PTEN的翻译后调控研究。基于其基础研究的发现,该实验室也致力开发潜在的癌症治疗及診断方法。姜教授作为莫愁的师兄,受莫愁邀请接受专访并讲述了从一个蛋白的功能或者说一个分子的功能来purify一个未知的分子。
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纪念斯隆-凯特琳癌症中心是世界上历史最悠久、规模最大的私立癌症中心。百年来,它一直致力于病人护理、研究创新,以及更好的理解、诊断和治疗癌症。作为美国最好的癌症中心之一,纪念斯隆-凯特琳癌症中心是美国41个被美国国家癌症研究院指定的综合癌症中心之一。在2014-15《美国新闻与世界报道》公布的的癌症专科评选中排名全美第一。
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采访:李斌
整理:徐亦迅
根据功能来纯化蛋白的技术关键是什么?
为什么有些蛋白特别难以纯化?
历史上有没有需要超巨量起始原料才能纯化成功的例子?
还有其它需要补充的吗?
感谢姜教授接受专访,也感谢徐亦迅帮忙整理采访稿(由于本文篇幅所限,莫愁只公布部分)
Rome was not built in a day
条条大路通罗马,莫愁认为这个命题本身就是不对的。为什么一定要去罗马?在罗马还没有建成之前去哪里?20年前的整个生物医学世界远没有现在那么发达,许多现在已经十分浅显、成为基础的知识,在那时可能都需要日以继夜的艰苦研究才能获取、认知。那时候没有所谓的基因组,也没有一大堆其他的工具。那时候设法拿到一个小分子的identify,也是非常非常难的。同样一个人可以用大约2小时的时间跑完菲迪皮茨人生最后一段路程,也可以驾车几首歌的时间轻松抵达。后者只是享受到了前人的智慧成果,前者却创造了历史。 回想所有的一切,从古至今,永远都是强者、智者掌握世界。历史只是他们的玩物。就像叙利亚是世界列强的玩物!决定敘利亚命运的是强者,但是承受结果的是当地的人,不管你什么族群、宗教。 决定分子命运的也不是分子自身,而是伟大的科研工作者。而我们更应该庆幸和钦佩做出改变,并且是好的改变的人!
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