常见荧光探针标记的扁豆凝集素/辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素(HRP-ConA)

凝集素的应用前景  凝集素的特殊的生物学功能，使其具有广泛的利用前景。特别是随着生物工程的研究手段和研究领域的不断扩大，凝集素的各种实际应用也展现了新的途径。  凝集素在生命机体中识别外来物，在体内<外)起调理作用。因此它在认识和解决集约化、半集约化的养殖生物的防病治病中有重要作用。对凝集素认识的普及和研究的深入将提高我国养殖业总体水平。对凝集素开发、利用和生化工程技术的拓展，将会使养殖业及其病害防治转化为高技术类型。  凝集素的防卫作用可应用于抗虫基因工程，为抗虫育种提供新的途径。雪花莲外源凝集素(GNA)对某些咀嚼式和刺吸式昆虫均有抗性，如烟草夜蛾、豇豆象、飞虱、叶蝉和蚜虫，但对高等动物没有毒性。将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的eDNA GNA 12和其前体蛋白eDNA GNA 34插入到二元载体pBin438的双倍增强子CaM V 35S启动子或二元载体pBcop l的CoYMV启动子下游，分别构建成植物表达载体pBGnal2、pBGna34、pBCGnal2和pBCGna34。  凝集素由于能和糖专一性识别，而且糖的专一性范围又广，加上易于分离

纯化，所以经常作为免疫学和糖生物学的分子探针，对生理、生化过程进行研究。先用标记物将凝集素标记，再利用标记的凝集素来研究糖复合物的结构、在生物体内的分布，也可用于研究生理、病理过程。比如研究精子在与卵子结合过程中，其细胞表面受体的种类和分布的变化：研究细胞分化发育过程中，糖结构发生的变化和蛋白质糖基化；恶性病变细胞表面糖类结构变化及转移过程中糖类结构特征等等。由于凝集素可与糖分子专一性可逆结合，从而被广泛用于分离纯化糖分子、糖蛋白、糖脂。利用凝集素分离糖蛋白开始于ConA分离酵母蔗糖酶。现在已有商品化的ConA、扁豆凝集素、PNA等亲合层析柱出售。目前，己应用GNA纯化鼠血清中免疫球蛋白2M的单克隆抗体，用ConA纯化绒毛膜促性腺激素(HGG)、人血清白蛋白、胰岛素受体等；还有，用PHA分离干扰素和免疫球蛋白等。另外，部分凝集素对人类及动物反转录病毒(含H IV)和巨细胞病毒具有选择性抑制作用。[3]  细胞在正常分化、发育或异常病变过程中，其表面糖链结构有很大的变化，癌变细胞往往表现出糖链的变化。且癌变细胞表面特异凝集索受体发生变化，凝集素可作为生物探针探测细胞表面糖分布及变异细胞表面糖的变化。扁豆凝集素和豌豆凝集素可鉴别诊断肝癌和肝炎患者血清中血清甲胎蛋白(AFP)的升高是源于肝癌细胞或是其它病肝细胞。国内有人采用此法鉴别肝癌和肝炎，使肝癌假阳性率明显下降。ConA可用于胎儿神经管缺陷及另一些畸形，如脊柱裂的产前诊断，这是～个很有价值的辅助诊断方法，几乎所有这类畸形的妊娠妇女，羊水中糖蛋白浓度显著降低，不与ConA发生作用或仅有轻微作用。溶酶体蓄积性疾病以某些特殊的水解酶缺乏为特征，如岩藻糖苷蓄积症病人，缺乏a—L一岩藻糖苷酶，其神经元及其它某些类型的细胞可与荆豆凝集素强烈作用，以辅助诊断。  T淋巴细胞在体外经凝集素激活后，可转化为淋巴母细胞，根据淋巴母细胞的转化情况，可反应机体的细胞免疫水平，监视各种免疫抑制和免疫增强的疗效。用淋巴细胞转化实验评价艾滋病人的免疫功效，亦是一个简单有效的方法。PHA、ConA等植物凝集素用作皮内注射可反应肿瘤、肝炎等患者的细胞免疫能力。我国目前普遍采用PHA作促细胞分裂原评价各种疾病患者的免疫功能。SBA可选择性沉淀在骨髓移植中引起排斥反应的T淋巴细胞，收集SBA处理过的骨髓成功地用于临床骨髓移植。PHA配合化疗、放疗或其它治疗能够提高单一疗法的疗效。对顽固性白血病、晚期恶性滋养叶肿瘤应用PHA合并疗法取得了明显疗效。甘润良等用I标记的花生凝集素对裸鼠载人胃癌进行靶向治疗，疗效显著，肿瘤抑制率达73．2％，可延缓肿瘤生长，延长了荷瘤宿主的生存期。并且对小鼠没有毒性作用。  凝集素也可在固氮工程中发挥作用。较近的研究发现识别根瘤菌的因子是豆科植物根上的凝集素。目前，固氮工程尝试将豆科植物的凝集素基因转化到非豆科植物，再接种豆科植物的根瘤菌，使该种非豆科植物被侵染和结瘤。固氮菌能在豌豆上形成根瘤，但不能在白三叶草根和发根中形成根瘤。若将PSL基因转入自三叶草后，白三叶草根毛上也产生了根瘤。PSL定位于转基因白三叶草根表皮细胞的外表面和根毛间段，但正常的三叶草和发根中则没有PSL。这种固氮方法应用于粮食作物将有很大的意义。  总之，凝集素较初在植物中被检测到并命名为盘凝索，一直到目前成为具有许多重要功能和用途的普遍存在的识别分子，在这120多年来，人们对凝集素的认识已经有了很大的提高。凝集素作为生物体内一类特殊的蛋白质(糖蛋白)，在防御病原体入侵、存贮营养物质、专化识别等方面有其独特的功能。我们可以利用这些特性，在生物工程、临床研究等各方面发挥作用，利用凝集素的功能造福人类。

小扁豆凝集素-琼脂糖凝胶

Acitavated CH Sepharose 4B

Acitavated CH-琼脂糖凝4B

Calmodulin Sepharose4B

钙调素-琼脂糖凝4B

Lentil lectin Sepharose4B

小扁豆凝集素-琼脂糖凝胶4B

双花扁豆凝集素(DBA)

黑皮扁豆凝集素

FITC-LCA 绿色荧光标记小扁豆凝集素

荧光探针标记的扁豆凝集素

扁豆凝集素凝胶

辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素(HRP-ConA)

辣根过氧化物酶欧曼陀罗凝集素((HRP-DSA)

辣根过氧化物酶麦胚凝集素(HRP-WGA)

辣根过氧化物酶小扁豆凝集素(HRP-LCA)

血清α1抗胰蛋白酶小扁豆凝集素

刀豆凝集素单克隆抗体

菜豆凝集素(PHA)单克隆抗体

美洲商陆(PWM)单克隆抗体

花生凝集素(PNA)单克隆抗体

扁豆凝集素(LcA)单克隆抗体

流脑多糖协同扁豆凝集素

扁豆凝集素十六烷基季铵盐包裹磁性纳米颗粒

小扁豆凝集素(LCA)的琼脂糖微量离心柱分离AFP-L3

改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球

红藻凝集素GRFT

蓝藻凝集素CVN

香蕉凝集素H84

wyf 03.30