宏基因组按：NCBI物种分类注释信息格式复杂，存在层级不整齐、缺失、名称变动等问题，在使用中存在一定困难。最近发现了一款分类信息查询和格式化的工具TaxonKit，该工具于2019年发布于Biorxiv上，目前已经被引用19次(Google学术，截止2020年2月7日)。推荐给大家，助力NCBI分类信息的使用和宏基因组数据分析。
图形摘要：软件的主要功能。a. 分类信息名称-ID转换、过滤、查询、LCA、格式化等。b. 名称历史追溯。
从事生物多样性的研究者对NCBI Taxonomy数据库一定不会陌生，
它包含了NCBI所有核酸和蛋白序列数据库中每条序列对应的物种名称与分类学信息。
大多数生态学研究对物种组成的描述都是基于NCBI Taxonomy数据库，
当然目前也开始使用其他数据库，如GTDB等。
NCBI Taxonomy数据库始于1991年，一直随着Entrez数据库和其他数据库更新，
1996年推出网页版。NCBI Taxonomy数据库官方地址为 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/taxonomy ，
公开数据下载地址为 https://ftp.ncbi.nih.gov/pub/taxonomy/ ，
数据每小时更新，每个月初生成一份数据归档存于 taxdump_archive 目录，最早可追溯到2014年8月。
TaxonKit是采用Go语言编写的命令行工具，
提供Linux, Windows, macOS操作系统不同架构（x86-64/arm64）的静态编译的可执行二进制文件。
发布的压缩包不足3Mb，除了Github托管外，还提供国内镜像供下载，同时还支持conda和homebrew安装。
用户只需要下载、解压，开箱即用，无需配置，仅需下载解压NCBI Taxonomy数据文件解压到指定目录即可。
源代码 https://github.com/shenwei356/taxonkit ，
文档 http://bioinf.shenwei.me/taxonkit （介绍、使用说明、例子、教程）
选择系统对应的版本下载最新版 https://github.com/shenwei356/taxonkit/releases ，解压后添加环境变量即可使用。或可选conda安装
conda install taxonkit -c bioconda -y
# 表格数据处理，推荐使用 csvtk 更高效
conda install csvtk -c bioconda -y测试数据下载可直接 https://github.com/shenwei356/taxonkit 下载项目压缩包，或使用git clone下载项目文件夹，其中的example为测试数据
git clone https://github.com/shenwei356/taxonkitTaxonKit为命令行工具，采用子命令的方式来执行不同功能，
大多数子命令支持标准输入/输出，便于使用命令行管道进行流水作业，
轻松整合进分析流程中。
| 子命令 | 功能 |
|---|---|
list | 列出指定taxID下所有子单元的的TaxID |
lineage | 根据TaxID获取完整谱系（lineage） |
reformat | 将完整谱系转化为“界门纲目科属种株”的自定义格式 |
name2taxid | 将分类单元名称转化为TaxID |
filter | 按分类学水平范围过滤TaxIDs |
lca | 计算最低公共祖先(LCA) |
taxid-changelog | 追踪TaxID变更记录 |
version | 显示版本信息、检测新版本 |
genautocomplete | 生成shell自动补全配置脚本 |
备注：
输出：
所有命令输出中包含输入数据内容，在此基础上增加列。
所有命令默认输出到标准输出（stdout），可通过重定向（>）写入文件。
或通过全局参数-o或--out-file指定输出文件，且可自动识别输出文件后缀（.gz）输出gzip格式。
输入：
除了list与taxid-changelog之外，lineage, reformat, name2taxid, filter 与 lca
均可从标准输入（stdin）读取输入数据，也可通过位置参数（positional arguments）输入，即命令后面不带
任何flag的参数，如 taxonkit lineage taxids.txt
输入格式为单列，或者制表符分隔的格式，输入数据所在列用-i或--taxid-field指定。
TaxonKit直接解析NCBI Taxonomy数据文件（2秒左右），配置更容易，也便于更新数据，占用内存在500Mb-1.5G左右。
数据下载：
# 有时下载失败，可多试几次；或尝试浏览器下载此链接
wget -c https://ftp.ncbi.nih.gov/pub/taxonomy/taxdump.tar.gz
tar -zxvf taxdump.tar.gz
# 解压文件存于家目录中.taxonkit/，程序默认数据库默认目录
mkdir -p $HOME/.taxonkit
cp names.dmp nodes.dmp delnodes.dmp merged.dmp $HOME/.taxonkittaxonkit list用于列出指定TaxID所在分类学单元（taxon）的子树（subtree）的所有taxon的TaxID，可选显示名称和分类学水平。
此功能与NCBI Taxonomy网页版类似。
如，
# 以人属(9605)和肠道中著名的Akk菌属(239934)为例
$ taxonkit list --show-rank --show-name --indent " " --ids 9605,239934
9605 [genus] Homo
9606 [species] Homo sapiens
63221 [subspecies] Homo sapiens neanderthalensis
741158 [subspecies] Homo sapiens subsp. 'Denisova'
1425170 [species] Homo heidelbergensis
2665952 [no rank] environmental samples
2665953 [species] Homo sapiens environmental sample
239934 [genus] Akkermansia
239935 [species] Akkermansia muciniphila
349741 [strain] Akkermansia muciniphila ATCC BAA-835
512293 [no rank] environmental samples
512294 [species] uncultured Akkermansia sp.
1131822 [species] uncultured Akkermansia sp. SMG25
1262691 [species] Akkermansia sp. CAG:344
1263034 [species] Akkermansia muciniphila CAG:154
1679444 [species] Akkermansia glycaniphila
2608915 [no rank] unclassified Akkermansia
1131336 [species] Akkermansia sp. KLE1605
...list使用最广泛的的功能是获取某个类别（比如细菌、病毒、某个属等）下所有的TaxID，
用来从NCBI nt/nr中获取对应的核酸/蛋白序列，从而搭建特异性的BLAST数据库。
官网提供了相应的详细步骤：http://bioinf.shenwei.me/taxonkit/tutorial 。
# 所有细菌的TaxID
$ taxonkit list --show-rank --show-name --ids 2 > /dev/null分类学数据相关最常见的功能就是根据TaxID获取完整谱系。
TaxonKit可根据输入文件提供的TaxID列表快速计算lineage，并可选提供名称，分类学水平，以及谱系对应的TaxID。
值得注意的是，随着Taxonomy数据的频繁更新，有的TaxID可能被删除、或合并（merge）到其它TaxID中，
TaxonKit会自动识别，并进行提示，对于被合并的TaxID，TaxonKit会按新TaxID进行计算。
# 使用example中的测试数据
$ head taxids.txt
9606
9913
376619
# 查找指定taxids列表的物种信息，tee可输出屏幕并写入文件
$ taxonkit lineage taxids.txt | tee lineage.txt
19:22:13.077 [WARN] taxid 92489 was merged into 796334
19:22:13.077 [WARN] taxid 1458427 was merged into 1458425
19:22:13.077 [WARN] taxid 123124124 not found
19:22:13.077 [WARN] taxid 3 was deleted
9606 cellular organisms;Eukaryota;Opisthokonta;Metazoa;Eumetazoa;Bilateria;Deuterostomia;Chordata;Craniata;Vertebrata;Gnathostomata;Teleostomi;Euteleostomi;Sarcopterygii;Dipnotetrapodomorpha;Tetrapoda;Amniota;Mammalia;Theria;Eutheria;Boreoeutheria;Euarchontoglires;Primates;Haplorrhini;Simiiformes;Catarrhini;Hominoidea;Hominidae;Homininae;Homo;Homo sapiens
9913 cellular organisms;Eukaryota;Opisthokonta;Metazoa;Eumetazoa;Bilateria;Deuterostomia;Chordata;Craniata;Vertebrata;Gnathostomata;Teleostomi;Euteleostomi;Sarcopterygii;Dipnotetrapodomorpha;Tetrapoda;Amniota;Mammalia;Theria;Eutheria;Boreoeutheria;Laurasiatheria;Artiodactyla;Ruminantia;Pecora;Bovidae;Bovinae;Bos;Bos taurus
376619 cellular organisms;Bacteria;Proteobacteria;Gammaproteobacteria;Thiotrichales;Francisellaceae;Francisella;Francisella tularensis;Francisella tularensis subsp. holarctica;Francisella tularensis subsp. holarctica LVS
349741 cellular organisms;Bacteria;PVC group;Verrucomicrobia;Verrucomicrobiae;Verrucomicrobiales;Akkermansiaceae;Akkermansia;Akkermansia muciniphila;Akkermansia muciniphila ATCC BAA-835
239935 cellular organisms;Bacteria;PVC group;Verrucomicrobia;Verrucomicrobiae;Verrucomicrobiales;Akkermansiaceae;Akkermansia;Akkermansia muciniphila
314101 cellular organisms;Bacteria;environmental samples;uncultured murine large bowel bacterium BAC 54B
11932 Viruses;Riboviria;Pararnavirae;Artverviricota;Revtraviricetes;Ortervirales;Retroviridae;unclassified Retroviridae;Intracisternal A-particles;Mouse Intracisternal A-particle
1327037 Viruses;Duplodnaviria;Heunggongvirae;Uroviricota;Caudoviricetes;Caudovirales;Siphoviridae;unclassified Siphoviridae;Croceibacter phage P2559Y
123124124
3
92489 cellular organisms;Bacteria;Proteobacteria;Gammaproteobacteria;Enterobacterales;Erwiniaceae;Erwinia;Erwinia oleae
1458427 cellular organisms;Bacteria;Proteobacteria;Betaproteobacteria;Burkholderiales;Comamonadaceae;Serpentinomonas;Serpentinomonas raicheisms;Bacteria;Proteobacteria;Betaproteobacteria;Burkholderiales;Comamonadaceae;Serpentinomonas;Serpentinomonas raichei与其它软件的性能相比，当查询数量较少时ETE较快，数量较多时则TaxonKit更快。
在不同数据量规模上 TaxonKit速度一直很稳定，均为2-3秒，时间主要花在解析Taxonomy数据文件上。
列出lineage每个分类学单元的的taxID和rank和名称，比如SARS-COV-2。
# lineage提取SARS-COV-2的世系
$ echo "2697049" \
| taxonkit lineage -t -R \
| sed "s/\t/\n/g"
2697049
Viruses;Riboviria;Orthornavirae;Pisuviricota;Pisoniviricetes;Nidovirales;Cornidovirineae;Coronaviridae;Orthocoronavirinae;Betacoronavirus;Sarbecovirus;Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus;Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2
10239;2559587;2732396;2732408;2732506;76804;2499399;11118;2501931;694002;2509511;694009;2697049
superkingdom;clade;kingdom;phylum;class;order;suborder;family;subfamily;genus;subgenus;species;no rank有时候，我们并不需要完整的分类学谱系（full lineage），因为很多级别即不常用，而且不完整。通常只想保留界门纲目科属种。
值得注意的是，不是所有物种都有完整的界门纲目科属种水平，特别是病毒以及一些环境样品。
TaxonKit可以用自定义内容替代缺失的分类单元，如用“__”替代。
更厉害有用的是，TaxonKit还可以用更高层级的分类单元信息来补齐缺失的层级 (-F/--fill-miss-rank)，比如
# 没有genus的病毒
$ echo 1327037 | taxonkit lineage | taxonkit reformat | cut -f 1,3
1327037 Viruses;Uroviricota;Caudoviricetes;Caudovirales;Siphoviridae;;Croceibacter phage P2559Y
# -F参数会用family信息来补齐genus信息
$ echo 1327037 | taxonkit lineage | taxonkit reformat -F | cut -f 1,3
1327037 Viruses;Uroviricota;Caudoviricetes;Caudovirales;Siphoviridae;unclassified Siphoviridae genus;Croceibacter phage P2559Y输出格式可选只输出部分分类学水平，还支持制表符（"\t"），再配合作者的另一个工具csvtk，可以输出漂亮的结果。
其它有用的选项：
-P/--add-prefix：
给每个分类学水平添加前缀，比如s__species。
-t/--show-lineage-taxids：
输出分类学单元对应的TaxID。
-r/--miss-rank-repl: 替代没有对应rank的taxon名称
-S/--pseudo-strain: 对于低于species且rank既不是subspecies也不是stain的taxid，使用水平最低taxon名称做为菌株名称。
例，
$ echo -ne "349741\n1327037"\
| taxonkit lineage \
| taxonkit reformat -f "{k}\t{p}\t{c}\t{o}\t{f}\t{g}\t{s}" -F -P \
| csvtk cut -t -f -2 \
| csvtk add-header -t -n taxid,kindom,phylum,class,order,family,genus,species \
| csvtk pretty -t
taxid kindom phylum class order family genus species
349741 k__Bacteria p__Verrucomicrobia c__Verrucomicrobiae o__Verrucomicrobiales f__Akkermansiaceae g__Akkermansia s__Akkermansia muciniphila
1327037 k__Viruses p__Uroviricota c__Caudoviricetes o__Caudovirales f__Siphoviridae g__unclassified Siphoviridae genus s__Croceibacter phage P2559Y
# 便于小屏幕查看，用csvtk进行转置
$ echo -ne "349741\n1327037"\
| taxonkit lineage \
| taxonkit reformat -f "{k}\t{p}\t{c}\t{o}\t{f}\t{g}\t{s}" -F -P \
| csvtk cut -t -f -2 \
| csvtk add-header -t -n taxid,kindom,phylum,class,order,family,genus,species \
| csvtk transpose -t \
| csvtk pretty -t
taxid 349741 1327037
kindom k__Bacteria k__Viruses
phylum p__Verrucomicrobia p__Uroviricota
class c__Verrucomicrobiae c__Caudoviricetes
order o__Verrucomicrobiales o__Caudovirales
family f__Akkermansiaceae f__Siphoviridae
genus g__Akkermansia g__unclassified Siphoviridae genus
species s__Akkermansia muciniphila s__Croceibacter phage P2559Y
# 到株水平，以sars-cov-2为例
$ echo -ne "2697049"\
| taxonkit lineage \
| taxonkit reformat -f "{k}\t{p}\t{c}\t{o}\t{f}\t{g}\t{s}\t{t}" -F -P -S \
| csvtk cut -t -f -2 \
| csvtk add-header -t -n taxid,kindom,phylum,class,order,family,genus,species,strain \
| csvtk transpose -t \
| csvtk pretty -t
taxid 2697049
kindom k__Viruses
phylum p__Pisuviricota
class c__Pisoniviricetes
order o__Nidovirales
family f__Coronaviridae
genus g__Betacoronavirus
species s__Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus
strain t__Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2将分类单元名称转化为TaxID非常容易理解，唯一要注意的是某些taxID对应相同的名称，比如
# -i指定列，-r显示级别，-L不显示世系
$ echo Drosophila | taxonkit name2taxid | taxonkit lineage -i 2 -r -L
Drosophila 7215 genus
Drosophila 32281 subgenus
Drosophila 2081351 genus获取TaxID之后，可以立即传给taxonkit进行后续操作，但要注意用-i指定taxID所在列。
filter可以按分类学水平范围过滤TaxIDs，注意，不仅仅是特定的Rank，而是一个范围。
比如genus及以下的分类学水平，用-L genus -E genus，类似于 <= genus。
$ cat taxids2.txt \
| taxonkit filter -L genus -E genus \
| taxonkit lineage -r -n -L \
| csvtk -Ht cut -f 1,3,2 \
| csvtk pretty -t
239934 genus Akkermansia
239935 species Akkermansia muciniphila
349741 strain Akkermansia muciniphila ATCC BAA-835比如人属的例子
$ taxonkit list --ids 9605 -nr --indent " "
9605 [genus] Homo
9606 [species] Homo sapiens
63221 [subspecies] Homo sapiens neanderthalensis
741158 [subspecies] Homo sapiens subsp. 'Denisova'
1425170 [species] Homo heidelbergensis
2665952 [no rank] environmental samples
2665953 [species] Homo sapiens environmental sampleTaxID的分隔符可用-s/--separater指定，默认为” “。
# 计算两个物种的最近共同祖先，以上面尼安德特人亚种和海德堡人种
$ echo 63221 2665953 | taxonkit lca
63221 2665953 9605
# 其它分隔符，且不小心多了空格
$ echo -ne "a\t63221,2665953\nb\t63221, 741158\n"
a 63221,2665953
b 63221, 741158
$ echo -ne "a\t63221,2665953\nb\t63221, 741158\n" \
| taxonkit lca -i 2 -s ","
a 63221,2665953 9605
b 63221, 741158 9606NCBI Taxonomy数据每天都在更新，每月初（大多为1号）的数据作为存档保存在 taxdump_archive/ 目录，
旧版本最早数据到2014年8月，新版本只到2018年12月。
TaxonKit可以追踪所有TaxID每个月的变化，输出到csv文件中，可以通过命令行工具进行查询。
数据和文档单独托管在 https://github.com/shenwei356/taxid-changelog 。
除了简单的增加、删除、合并之外，作者将TaxID改变做了细分。输出格式如下
# 列 备注
taxid # taxid
version # version / time of archive, e.g, 2019-07-01
change # change, values:
# NEW 新增
# REUSE_DEL 前期被删除，现在又重新加入
# REUSE_MER 前期被合并，现在又重新加入
# DELETE 删除
# MERGE 合并到另一个TaxID
# ABSORB 其他TaxID合并到当前TaxID
# CHANGE_NAME 名称改变
# CHANGE_RANK 分类学水平改变
# CHANGE_LIN_LIN 谱系的TaxID没有变化，谱系改变（某些TaxID的名称变了）
# CHANGE_LIN_TAX 谱系的TaxID改变
# CHANGE_LIN_LEN 谱系的长度/深度发生变化
change-value # variable values for changes:
# 1) new taxid for MERGE
# 2) merged taxids for ABSORB
# 3) empty for others
name # scientific name
rank # rank
lineage # full lineage of the taxid
lineage-taxids # taxids of the lineage数据文件可以在前面网站上下载，taxid-changelog.csv.gz，130M左右，解压后2.2G，因为是gzip格式，完全不需要解压即可分析。
下文使用了pigz代替zcat和gzip提高解压速度。
例1 superkingdom也能消失 ，比如类病毒(Viroids)在2019年5月被删除了。
作者是在某一天无意中发现此事，所以决定刨根问底，开发了这个子命令。
# 下载
wget -c https://github.com/shenwei356/taxid-changelog/releases/download/v2021.01/taxid-changelog.csv.gz
# 安装多线程解压索软件。或者用gzip替换。
conda install pigz
$ pigz -cd taxid-changelog.csv.gz \
| csvtk grep -f rank -p superkingdom \
| csvtk pretty
taxid version change change-value name rank lineage lineage-taxids
2 2014-08-01 NEW Bacteria superkingdom cellular organisms;Bacteria 131567;2
2157 2014-08-01 NEW Archaea superkingdom cellular organisms;Archaea 131567;2157
2759 2014-08-01 NEW Eukaryota superkingdom cellular organisms;Eukaryota 131567;2759
10239 2014-08-01 NEW Viruses superkingdom Viruses 10239
12884 2014-08-01 NEW Viroids superkingdom Viroids 12884
12884 2019-05-01 DELETE Viroids superkingdom Viroids 12884例2 SARS-CoV-2 。可见新冠病毒在2020年2月加入，随后3月和6月份改了名称，谱系等信息。查询速度也很快。
# 本例子只显示了部分列。
$ time pigz -cd taxid-changelog.csv.gz \
| csvtk grep -f taxid -p 2697049 \
| csvtk cut -f version,change,name,rank \
| csvtk pretty
version change name rank
2020-02-01 NEW Wuhan seafood market pneumonia virus species
2020-03-01 CHANGE_NAME Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 no rank
2020-03-01 CHANGE_RANK Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 no rank
2020-03-01 CHANGE_LIN_LEN Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 no rank
2020-06-01 CHANGE_LIN_LEN Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 no rank
2020-07-01 CHANGE_RANK Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 isolate
2020-08-01 CHANGE_RANK Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 no rank
real 0m7.644s
user 0m16.749s
sys 0m3.985s更多有意思的发现详见
https://github.com/shenwei356/taxid-changelog
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