鱼粉价居高不下，饲料中替“粉“盛行，对鱼虾健康影响非常严重，该怎么办？

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人参发酵物在凡纳滨对虾饲料中添加效果评估报告

中山大学，生命科学学院，水生动物营养与饲料实验室姚蓉，牛津

背景介绍：鱼粉价格居高不下，以及其对进口的高度依赖，使得“降鱼粉”一直备受饲料企业和科研院校所关注。已有研究表明，某些动植物源性原料低比例（10-20%）替代鱼粉是可行的，但使用这些原料高比例（20%以上）替代鱼粉时，会对水产动物生长、免疫功能和肝肠健康产生较为严重的不利影响。人参发酵物的主要成分是人参多糖和人参皂苷，人参多糖具有“益生元”和双向调节免疫的作用，人参皂苷能通过保护神经和血管从而促进组织修复，具有较强的抗胁迫能力。人参发酵物或能改善某些原料高比例替代鱼粉带来的负面影响。因此，我们开展了人参发酵物在凡纳滨对虾饲料中的应用研究。

实验目的

评价人参发酵物对凡纳滨对虾生长性能、消化代谢及肝肠健康的影响。

材料与方法

2.1实验饲料

表1中饲料的全部原料粉碎后均经60目筛网过筛，按照配方准确称重，在塑料袋中手工预混合均匀后，转移至搅拌机（A-200T Mixer Bench Model unit，Resell Food Equipment Ltd.，Ottawa，Canada）中混合5 min，加入鱼油，豆油和大豆卵磷脂，混合5 min，然后加入40%水（v:w），继续混合10 min。原料混合均匀后，用膨化机制成颗粒状饲料。80℃蒸汽熟化90 min后，将饲料风干至水分低于10%，装入塑料密封袋中，存放于-20℃冰柜中备用。其中，人参发酵物由湖南微草生物科技有限公司提供。

表1，人参发酵物在凡纳滨对虾饲料中添加效果配方表

2.2实验管理

2.2.1养殖实验

实验开始时挑选大小一致的实验用虾（体重约1.7g）并随机进行分组实验。每个水族箱（500L）40尾，每个处理设4个重复。实验前15天，若虾出现死亡或异常情况，便从暂养池中补充规格相近的健康虾，并做好记录（池号、时间、被替换虾和替换虾的重量）。养殖实验开始15天之后如果出现死虾，只称重记录，不补虾。

实验期间，养殖系统的水质控制在盐度15~20‰，溶氧>5ppm，水温25-30℃，pH为7-8.5左右，总氨氮<1.0ppm，亚硝酸盐<0.3ppm。正式实验期间每日早（8:00）、中（15:00）、晚（22:00）定时投喂3餐，喂料后一个小时查料，以确定之后的投喂量。

2.2.2样品采集

8周养殖实验结束，停止投喂24 h后，称量每个桶的虾总重，并记录每桶的虾尾数，此作为最终的生长和成活率结果。用虹吸法收集粪便，用于消化率测定；每箱随机取4尾虾进行解剖，将一部分肝脏放入多聚甲醛固定液，24h后将样品转移至75%的乙醇溶液用于切片制作；另外一部分肝脏样品存放于液氮保存用于酶活，分泌型免疫球蛋白和免疫性能指标分析；取一部分中肠放入多聚甲醛固定液，24h后将样品转移至75%的乙醇溶液用于切片制作，另一部分存放于液氮保存用于酶活，分泌型免疫球蛋白和免疫性能指标分析，取后肠用于菌群检测分析。随后进行氨氮应激预实验以确定浓度，最终总氨氮浓度为30.76mg/L，处理72h后，再次用与之前相同的方式进行取样。

2.3数据处理与统计分析

生长与形态学指标计算公式：

初始均重IBW(g)=实验开始时鱼总重量/实验开始时总尾数

终末均重FBW(g)=实验结束时鱼总重量/实验结束时总尾数

增重率WG(%)=（终末均重-初始均重）/初始均重×100

特定生长率SGR(%)=（ln终末均重-ln初始均重）/实验天数×100

饲料系数FCR=实验期间摄入的饲料总量(g)/实验结束时鱼增加总重量(g)

存活率SR(%)=终末鱼尾数/初始鱼尾数×100

本次实验结果均用“平均值±标准误”的形式来表示。使用SPSS 26.0统计软件进行数据分析，各组测定数据经单因子方差ANOVA分析以及Duncan’s多重检验来比较实验结果各组之间的组间差异显著程度(P<0.05)。

实验结果

3.1不同饲料对凡纳滨对虾生长与形态的影响

凡纳滨对虾的生长和形态指标结果如表2所示。D1和D6组的生长性能（末均重、增重率、特定生长率）数值最大，且增重率和特定生长率显著高于D2、D4和D7组（P<0.05），而和D3、D5没有显著性差异（P>0.05）；不同实验组的摄食量也体现出了相应的影响；饲料系数在各组间没有显著性差异（P>0.05）；D1的对虾成活率数值最低（82.22%）且显著低于D3、D5和D7（P<0.05），而和其他各组没有显著性差异（P>0.05），其中D7组的成活率最高；综上所述：D1和D6组凡纳滨对虾的生长效果较好。

表2，不同饲料产品对凡纳滨对虾生长与形态的影响

*表中数据为平均数±标准误（Mean±SEM，n=3），同行数据后肩标字母不同者表示相互间差异显著（P<0.05）

3.2不同饲料对消化能力的影响

3.2.1饲料干物质消化率结果

凡纳滨对虾的饲料干物质消化率结果如图1所示。（1）D1组的消化率显著高于除D6组外的其他各组（P<0.05），D1和D6组两者之间没有显著性差异（P>0.05）；（2）D5和D6组没有显著性差异（P>0.05）；（3）D2组的消化率显著低于其他组（P<0.05）；综上所述，人参发酵物为0.04%-0.05%的D5和D6组能够提高对虾对饲料干物质的消化吸收率。

图1不同饲料对凡纳滨对虾的消化率的影响

D1-20%鱼粉,D2-D7 10%鱼粉+0%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%人参发酵物；柱状图上方字母不同者表示相互间差异显著（P<0.05）

3.2.2消化酶活数据

凡纳滨对虾的肝胰腺消化酶活结果如图2所示。D5的脂肪酶和淀粉酶酶活显著高于其他实验组（P<0.05），但其糜蛋白酶与其它实验组没有显著差异（P>0.05），且淀粉酶酶活与对照组也没有显著差异（P>0.05）。说明D5组有助于提高对虾消化能力。

图2不同饲料产品对凡纳滨对虾消化能力的影响

D1-20%鱼粉,D2-D7 10%鱼粉+0%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%人参发酵物；LPS:脂肪酶，CT：糜蛋白酶，AMS：淀粉酶；柱状图上方字母不同者表示相互间差异显著（P<0.05）

3.4不同饲料对肠道形态影响

凡纳滨对虾的肠道组织形态如图4所示。从切片的图片来看，不同饲料并没有影响凡纳滨对虾的后肠发生显著的组织学变化，各处理组的肠道均保持良好的组织形态，不存在明显病理学变化，表示养殖环境良好。但通过进一步统计分析显示，D4组的肠绒毛高度显著高于其他组（P<0.05）；D7组的肠绒毛宽度显著高于其余各组（P<0.05）；D2组的肠壁肌层厚度显著高于其他组（P<0.05）；综上所述，人参发酵物添加量为0.03%的D4组对虾肠道绒毛高度、宽度、肠壁肌层厚度的影响相较于其他组较好对肠道健康具有促进作用。