在《GMP附录1：无菌药品》中提到【洁净区的设计必须符合相应的洁净度要求，包括达到“静态”和“动态”的标准。】
我们都知道，静态测试和动态测试一般都具有悬浮粒子和微生物。采集取样是必不可缺的重要步骤，那么在验证中如何进行有效取样呢？怎样的设计方法才最合理呢？让我一一为大家进行分析并举例说明。
静态测试取样的主要目的是提供有价值并可用于判断的数据，以便确认空气净化系统能够达到相应的设计洁净级别，取样点设计宜力求均匀。
1悬浮粒子
示例
C_n（≥0.5）=20个/立方米，根据公式计算单次最低取样量V_S=(20/20)×1000=1000L。如使用粒子计数器的流量为100L/min，取样时间不少于10min。
C_n（≥0.5）=29个/立方米，根据公式计算单次最低取样量V_S=690L。洁净厂房验证中可以按1000L采样。
C_n（≥0.5）=2900个/立方米，根据公式计算单次最低取样量V_S=7L。如使用粒子计数器的流量为50L/min，取样时间不少于1min。
取样量至少为2L，取样时间最少为1min。
每个采样点采样次数可多于1次，且不同采样点的采样次数可以不同，每个洁净区域一般满足5次采样。
2浮游菌
2.1 采样点数量参考悬浮粒子要求。
2.2 采样位置参考悬浮粒子要求。
2.3 采样量，根据GB/T 16292-2010通常设计最小采样量是A级1000L、B级1000L、C级500L、D级100L，每个采样点一般采样一次。
3沉降菌
3.1 采样点数量参考悬浮粒子要求。
3.2 采样位置参考悬浮粒子要求。
3.3 最少培养皿数，在满足最小采样点数量的同时还宜满足最少培养皿数，单向气流下通常不少于14个。
3.4 每个采样点一般采样一次，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数，每个位置的沉降碟至少暴露0.5小时，累计暴露时间为4小时。
动态测试时悬浮粒子、微生物取样的设计
动态测试取样的主要目的是提供有价值并可用于判断的数据，以便鉴别/识别特定程序、设备、材料和工艺相关的实际或潜在的污染。取样应设在如果取样点受到污染，则产品很可能受到污染的那些位置，但必须谨慎地确定取样点的位置，靠近产品但不要接触产品。
1悬浮粒子
1.1 取样点数量确定，可参考“静态”测试的要求，同时还宜考虑取样位置是否需要选定额外的取样点。
1.2 取样位置确定，人员是对环境产生活性和非活性微粒的重要因素，通常选择门口（人员流动较大）、操作台面附近（生产活动多）、回风口附近（粒子浓度较大区域）、距回风口最远角（容易形成气流死角）等位置，同时应考虑选择的取样位置不能干扰洁净环境或增加产品污染的风险。
1.3 取样量，可参考“静态”测试要求。
2浮游菌
2.1 取样点数量确定，参考“动态”悬浮粒子取样点数要求。
2.2 取样位置的选择除参照“动态”悬浮粒子取样位置确定要求外，同时应考虑微生物污染极有可能对产品质量造成不良影响及最有可能表现出实际生产过程中微生物扩散最严重的位置或者有助于污染蔓延的区域。
2.3 取样量，参考“静态”浮游菌测试要求。
3沉降菌
3.1 取样点数量，参考“动态”悬浮粒子取样点数要求。
3.2 取样位置，参考“动态”浮游菌取样位置选择要求。
3.3 最少培养皿数，参考“静态”沉降菌测试要求。
3.4 每个采样点一般采样一次，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数，每个位置的沉降碟累计暴露时间为4小时。
4表面微生物
4.1 取样点数量依据表面微生物取样位置评估结果确定。
4.2 取样位置，通常考虑每个生产环境要互与产品的接触程度，很可能给产品带来生物负荷的位置，包括最难接近或最难清洁、灭菌或消毒位置，设备表面，储存容器，传送带，人员手套及墙壁、地面、门把手、椅子、测试仪器、传递窗、控制面版等位置，同时应考虑选择的取样位置不能干扰洁净环境或增加产品污染的风险。
以上信息是对洁净厂房验证中悬浮粒子、微生物取样设计的浅析，描述了悬浮粒子、微生物取样的基本原则。在应用过程中还应结合企业实际评估取样位置及取样次数，并画出布点图说明理由。关于这方面设计欢迎您提出其它见解，请大家积极留言！
【参考文献】
1. 药品生产质量管理规范（2010年修订）及附录
2. ISO 14644-1
3. GB/T 16292-2010
4. GB/T 16293-2010
5. GB/T 16294-2010
6. PDA Technical Report No.13(Revised 2014)
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