缓冲剂Tris-HCL与HEPES之间的优势在哪里？

生物缓冲剂在生物实验中会经常被用到，它们种类繁多，可能你需要的缓冲剂和你选的缓冲剂表面符合，实际使用时就存在一定的差异，所以选好合适的缓冲剂是很有必要的；同时，不同缓冲液差别也很大。德晟带你来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的之间的区别。

  

 

Tris-HCl缓冲液

Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。

Tris-HCl缓冲液优点                  

1、 Tris-HCl缓冲液稳定，与生理体液的相容性好（Tris-HCl与钙、镁离子不会形成沉淀；相反，磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀）；

2、而且相同PH，相同浓度的Tris-HCl缓冲液的离子强度低，这对酶类测定尤为重要，因为大离子强度易致有些酶失活。因此，有时用Tris-HCl代替磷酸盐缓冲液，效果更好。

Tris-HCl缓冲液缺点：

1、温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.4

2、pH值受溶液浓度影响较大，稀释十倍，pH值的变化大于0.1；

3、对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

4、易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。 

HEPES缓冲液

HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。

HEPES缓冲液优点：

pKa值介于6.0和8.0之间；

在水中具有高溶解度；

具有膜不透性，不易穿透生物膜；

对生化反应影响有限，可耐化学和酶解作用，且不与金属离子生成复合物或沉淀；

有极低的可见光和紫外光吸收；

离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;

HEPES缓冲液缺点：

如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时，会产生细胞毒性的H2O2；

HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果；

而配置成溶剂后，要在4℃下保存，建议在短期内使用效果更佳；

HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内，不能直接长时间照射阳光。