​胆红素提取工艺规程

胆红素是从猪胆汁中提取的胆色素，为橙色粉末。易溶于氯仿(即三氯甲烷CHC13)。不溶于水和乙醚，在酒精中溶解得很少。其盐类则溶于水。在氯仿中结晶的纯品，为橙色单斜片状。它易氧化成胆绿素，无特殊气味。胆红素主要用途是供合成珍贵中药牛黄及作试剂用。目前各地生化制药厂及外贸公司收购纯品价格是每公斤在18000-20000元

提取胆红素主要需要以下设备和工具:① 火山式夹层倾斜锅(可用普通铝锅代);② 大分液漏斗(分离抽提液用);③ 电动搅拌器(酸化用、可用人工搅拌代替);④ 水浴箱(回收氯仿。浓缩和水洗时用、一般容器可代);⑤ 向瓷缸(装石灰水和胆汁用);⑥ 搪瓷桶;⑦ 球瓶(容量为10000~15000毫升，回收氯仿用;⑧ 玻璃冷凝管(规格为100厘米长，回收氯仿用);⑨ 布氏漏斗(可用普通漏斗内加二层左冶"的确凉”滤布代，精制抽滤时用);⑩ 玻璃瓶及其他容器等;① 台式天平秤(克秤可代用);⑩ 比重计。

提取胆红素的主要原材料、辅助材料及规格是:① 猪胆:新鲜冰冻，不得腐败变质:② 石灰:工业纯;③ 盐酸:工业纯;④氯仿:工业纯;⑤ 酒精:85%以上浓度;⑥ 无水乙醇(即无水酒精、化学纯);⑦ 乙醚;化学纯;⑧ 偏重亚硫酸钠(抗氧剂);⑨ 精密酸碱测试纸(PH1-5)。

提取工艺 过程:

一、原料处理:取新鲜猪胆(或冻猪胆，解冻后用)，称重后。置于竹箕内，剪破胆皮(或放入绞肉机内绞破胆皮)，滤去胆皮，剩下胆汁，用单层纱布:过滤一次，除去油脂和杂物、再称其重量。移入可倾锅内、准备用以制备钙益。

二、制备钙盐:取优质生石灰，加入适量自来水，制成乳白色的饱和石灰水溶液(比重1·02)，再按胆汁重量与石灰水重场为1:0-7的比例，把石灰水慢慢加入胆汁中(注意;加的时候应保持石灰水的浓度均匀，边加边不断搅拌)，同时逐步升高可倾锅内的蒸汽压力、使之逐步加热，加完后，再充分搅拌5-10分钟，并使汽压控制在每平方厘米1-1.5公斤之间，随着温度的不所开高(设限为90C)锅边便不断有橙色钙盐折出，浮于液面，并向中同聚集。待全部沸腾二分钟后(注流防止钙盐游出)立即减压降温，同时放出夹层中的余汽余水，销冷却后，用寸轻轻将大那分浮于液面的钙盐微出、用丙层纱布滤干，将锅中的母液移入缸内 f可供侧胆酸钠用)，再将沉于锅底的少部分胆钙盐取出，合并上面的胆钙盐，一起滤干称重，待酸化

三、胆钙盐的酸化:称取一定量的胆钙盐，加入为胆钙盐重位80%的自来水，将钙盐搅拌捣烂成泥浆状，经30-40目筛过滤一次，落后在滤出的浆状液中加入0.03%(即100公斤胆汁加入30克)偏重亚硫酸纳抗氧剂，再置酸化桶中(糖瓷桶中加电动搅拌器)，逐步加入工业纯盐酸进行酸化(边加边搅拌),。酸化到PH值达到I·5为止。(一般以150公斤猪胆或100公斤胆汁制备出8-10公斤胆钙盐为准，则酸化时间达4小时左右。用酸兰大约为4000毫升，如果目测。在气温较高的夏天，酸化液的色泽由橙色变为深草绿色时，即认为达到酸化要求)。酸化好了，静置半小时，然后用两层纱布过滤，将酸化液滤出(可用)以制取猪胆氧酸钠)，保留沉淀物，称重，用于下一步酒精沉淀。

四，酒精沉淀:将上面酸化液中演出的沉淀物，加入8-10倍盐、浓度为30%以上的酒精，搅拌，捣碎沉浞物，然后移入瓶中，再加入0.03%的偏重亚硫酸钠抗氧剂，觉半均匀、静置12小时以上，让其分层沉淀(如在冬天，气温很低时，则酒精妥先预热，混合液置放过程中姿保温、否则，不易分层沉淀)。

五、水洗:用虹吸法吸去置放在瓶中上层深绿色溶液，将下层橙色沉淀物倒入2-3倍量的自来水中，加0.03%的抗氧剂,搅拌、置水浴中加温至500进行洗涤，约2小时，让其分层，橙色沉淀物则浮于水面、用虹吸法吸云下层清水(若温度太高而不易分层时，则直接加入氧仿，使橙色物溶于氯仿中，再将上层清水除去)。

六、氯仿抽提:把经水洗后的橙色沉淀物(时上面第五步中所得的沉淀物)装入分液漏斗中，加4-5倍最的氯仿及0.03%的抗氧剂，充分搅拌或振荡，使橙色沉淀物中的胆红素充分溶解于氧仿中，并置放4小时以上(冬天气温较低时，则需用40℃水浴保温)，让其分层。然后将下层含胆红素的提取液分出(保存待用)，.将留下的上层沉淀物倒入搪瓷酸化柏内，加盐酸并搅拌，调至PH值为1，然后重新装入分液漏斗中，进行第二次抽提。先往分液漏斗中加入1-2倍量的氯仿和0.03%的抗氧剂，搅拌振荡，置放1小时后如上法分出抽提液和沉淀物，沉淀物可贮存起来，待下批加2时，再并入抽提处理(因其中还含有少量可拍提的胆红索)。分出的抽提液则跟第一次的抽提液合并，准各下一步回收浓缩。

七，回收浓缩:将抽提液装入大球瓶中，加入0.03%抗氧剂，摇匀，接上冷藏管，于水浴中加热至沸腾，蒸发回收氯仿，直到氯仿从抽提液中蒸发回收完了为止。然后将球瓶中剩下的少量胆红素浓缩液，倒入小挖瓷桶内，加入4至5倍置、浓度在85%以土的酒精，置于水浴中(50℃为宜)散口蒸发半小时左右。

八、精制:村散口蒸发后的胆红素浓邹液，倒入布氏滑斗中(可用普通漏斗加二至三层白色“的确凉”布代巷)进行真空抽滤。第一次滤于后，再往布氏漏斗中加入经微热后的85%以上的酒精进行洗涤拍滤，如上法重复多次，洗至下面漏斗口流下的滤液无色为止。然后用无水酒精(浓度在98%以上)洗涤批扔三次(用 最大约为200-250毫升)，倒出抽滤玻璃瓶中的洗涤液(可回收其所含的酒精)。最后用100-150毫升乙醚洗涤抽滤1-.2次(可将滤液中乙醚回收再用)，滤干5至10分钟后，即可将布氏漏斗中的胆红素取出，称重，送入烘箱内干燥。

九、干燥和取样送检:精制后的湿胆红素盛玻璃蒸发器中，放进恒温烘箱(可自制)中进行脱水干燥(温度控制在50℃左右)干燥 数天后，取样送有关化验室(文生化制药厂的分析室)检验，含量仓格后，称其千重，即可包装于坚岗波璃容器中避光贮存，准备出售。

此法提取的胆红案，以胆重业计，得率为万分之二点五左右;以胆汁重量计，得率为万分之三点过左右。妥求胆红素含量不低于80%，色泽应为橙色。