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实验目的
该实验测量嗅觉、记忆力和社交兴趣。首先向小鼠呈现三种非社交气味线索。每种气味在连续三次试验中给出三次。如果小鼠有正常的嗅觉和记忆力,它们应该习惯熟悉的气味,并且在每次试验中花更少的时间研究气味。每次受试者接触到新的气味时,嗅探时间应该再次增加。接下来,它们会获得来自两名不同卵巢切除雌性(OEF)的尿液样本,以评估它们识别和记忆社交线索的能力。在连续三次试验中,社交线索也会出现三次,随着时间的推移,小鼠应该会习惯这种气味。在非社交阶段缺乏对新气味的习惯或无法区分新气味和旧气味可能表明一般嗅觉缺陷。对OEF尿液的不良习惯和不习惯可能表明存在社交缺陷。
实验材料
任何品系的小鼠都可。
仪器:一个空的笼子,棉签。
配件:切除卵巢的雌鼠(尿液),杏仁提取物,香草提取物,水,微管,秒表。
测试设置
为了收集尿液,将每只切除卵巢的雌性放在一个底部有铁丝网的空笼子里,在黑暗周期中放置12小时。用移液管从笼子的底部收集尿液。将每只小鼠的样本放在一个不同的试管中。
准备每种非社会气味的1%的提取溶液,切除卵巢的雌性的尿液未被稀释。
一般测试程序
非社会试验:
动物应在测试前一小时适应试验室。
数据可以通过现场收集或通过视频评分来收集。
将100µL的水移到棉签的一端,将处理后的末端放在笼子底部上方1厘米处,这样小鼠就可以在不用饲养的情况下探索棉签。以与所使用的笼子和盖子兼容的方式连接棉签。
每只小鼠应进行2分钟的试验,间隔3分钟。
记录小鼠嗅探棉签的时间,嗅探的定义是鼻子和棉签之间的直接物理接触,咀嚼不算数。
在2分钟的试验结束后,将小鼠放入一个完全不同的笼子里,等待试验间隔。用第一个棉签准备一个新的棉签,并替换第一个棉签。在3分钟的试验间隔结束时,将小鼠放回测试笼子中,让小鼠再次探索新的棉签2分钟。
用与前两种棉签相同制备的第三个棉签重复这个过程。
在三次水试验后,用杏仁溶液进行三次试验。
用香草溶液再试三次。
社会试验:
在第二天进行社会试验。
每次社会试验持续2分钟,试验间隔为10分钟。
这些气味应该以与非社会性的气味相同的方式呈现。每只小鼠应该用来自第一个切除卵巢的雌性的未稀释尿液进行三次试验,然后用来自不同切除卵巢的雌性的尿液进行三次试验。
数据分析
比较每次试验的嗅探时间,嗅觉和记忆正常的小鼠在每次试验中应该花更少的时间来研究相同的气味。每次出现新的气味时,嗅探的时间就会增加;
在每一种新气味的第一次试验中,小鼠应该花至少10秒的时间进行嗅探。较短的嗅探时间可能表明小鼠或气味样本存在问题;
闻用清水处理过的棉签的时间作为闻到其他气味的基线。
- 试验简要示意图 -
注意事项
持续提供测试气味是很困难的,尤其是在较低浓度(在检测阈值附近)时,因为气味在测试过程中被扩散稀释,在测试过程中保证小鼠接触到恒定浓度的气味;
测试时应使用雄性小鼠以避免动情周期的影响;
实验人员在实验过程中不得佩戴有强烈气味的气味产品,不得发出过大的噪音。由于很难完全去除实验者身上的个人气味,建议在测试前处理小鼠以使其适应的同一实验者在整个测试过程中执行所有过程。
当测试阶段在专用测试室开始时,实验者需要远离。
引用文献
Kobayakawa et al., 2007
Ferquson et al., 2000
Takahashi et al., 2016
Bevins and Besheer, 2006
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