细菌 革兰氏染色改良法

试剂：

①苯胺品红液：

碱性品红（ Fuchsine base，rosanilin碱性紫14，玫瑰苯胺盐酸盐， 盐基品红，碱性新品红）0.6克、石炭酸（Carbolic acid，苯酚或羟基苯Phenol）1克分别溶于30%酒精100毫升，全溶后加入苯胺（Aniline氨基苯，安尼林或安尼林油）1毫升，过滤后使用

②结晶紫溶液：

结晶紫（Crystal Violet）0.5克溶于蒸馏水90毫升，加苯胺2毫升和无水酒精10毫升

③革兰氏碘液：

碘（Iodine）0.5克，碘化钾（Potassium iodide）1克，蒸馏水150毫升

③苦味酸饱和水溶液：

苦味酸（2.4.6-三硝基酚，Picric acid）约1.22克溶于蒸馏水100毫升

方法：

⑴石蜡切片常规脱蜡至水

⑵苯胺品红液染10~30分钟，自来水洗1分钟

⑶甲醛（Formaldehyde）液数秒至切片呈玫瑰红色

⑷自来水洗1~2分钟，蒸馏水洗5~10秒

⑸苦味酸饱和水溶液3~5分钟

⑹自来水洗1~2分钟，蒸馏水洗5~10秒

⑺结晶紫液染3~5分钟

⑻自来水洗1~2分钟，蒸馏水洗5~10秒

⑼革兰氏碘液1分钟，用吸水纸吸干切片周围的碘液

⑼苯胺二甲苯等量混合液洗涤切片至不褪色为止

⑽二甲苯透明，中性树胶封片

结果：

革兰氏阳性细菌紫蓝色；

革兰氏阴性细菌红色