七、切片、展片和贴片、烤片(具体操作:切片、展片,时间20~30分钟)
这是一个连续的过程,一并在讲述
事先打开摊片机的电源并设置 温度35~50℃
1 切片
从模具上取下蜡块,固定切片机手轮;
放下防护装置;
将蜡块固定在切片机的头部;
打开手轮锁,将切片机切片与蜡块接触;
在TRIM状态下,设置较大的数字(10~40微米),用于修切蜡面,将蜡块内的组织切面全部暴露出来,如蜡中心有空洞(不是组织的空洞),应继续修切
待切片表面全部切出,切换至SECT状态,调整厚度(5~10微米),保持匀速状态 ,顺时针方向旋转,蜡片掉在切片刀片上,用毛笔轻轻顺势将其拖下来
切片厚度与组织大小有关,较大的组织,不易切成薄片;较小的组织,不能切成较厚的切片。
对于易脆易碎的组织,随时调整切片厚度。
一般切片,厚度5~10微米;骨切片、骨骼肌切片10~20微米;脊髓切片8~15微米(显示突起);用于免疫组化和特殊染色的切片,其厚度有特殊要求,如2~5微米,前提时保证切片展开后完全平整,尽量减少皱褶
2 展片和贴片
将拖下来的蜡片放入冷水中,用镊子轻轻顺势将其拉平;
移入摊烤片机的温水中,蜡片立即展开,用镊子将其有皱褶的部分拉平
将玻片斜插入水中,使玻片的一面与蜡片接触,用镊子将其捞至玻片的右三分之一处,略立干水,放于右侧的烤片箱略烤干,再转移至烘片机中烤干
摊烤片机具有如下功能:定时开关机;装水、烤片和粪片三位一体
3 烤片
贴片后放37℃温箱内24小时或60~70℃1~2小时,保证蜡片上完全无水,便于染色。
注意:切片的安全问题
切片中途或安装蜡块时,应固定手轮并放下防护装置;
切片刀片滑下时,不能用手去抓取或接取!
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