肥大细胞特殊染色

肥大细胞（Mast cell）

来源于未分化的间充质细胞

正常多见于小血管周围，结缔组织中有少量，常见于支气管周围和胰腺的小叶间导管周围，肠系膜小血管周围较多

比一般细胞大（直径20~30微米），圆形或椭圆形，核较小，圆形，胞质充满粗大并具异染性的圆形 嗜碱性颗粒，HE染色呈红色

肥大细胞颗粒含肝素、组织胺、慢反应物质和嗜酸性粒细胞趋化因子等成分，参与过敏反应

取材要组织新鲜，迅速固定，颗粒因存放过久而被破坏

染色方法：

硫堇法、甲苯胺蓝法、苏木精-中性红法、陶利新蓝沙黄法、醛品红-橘黄G法等

硫堇法或甲苯胺蓝法将肥大细胞颗粒染成红紫色，其他组织蓝色

苏木精中性红法将细胞颗粒染成红色

阿利新蓝沙黄法将幼稚型肥大细胞染成蓝色，成熟型肥大细胞颗粒染成红色

醛品红-橘黄G法将肥大细胞颗粒染成深紫色，其他细胞不着色，背景橙黄色，对比清晰

甲苯胺蓝染色法

试剂：

甲苯胺蓝液：甲苯胺蓝(Toluidine blue)0.5克，加蒸馏水至100毫升

0.5%冰醋酸液：冰醋酸（Glagial acetic acid)0.5毫升，蒸馏水99.5毫升

方法：

⑴组织固定于10%甲醛生理盐水或甲醛酒精液，常规脱水包埋切片。

⑵切片常规脱蜡至水。

⑶甲苯胺蓝液染20~30分钟，水速洗。

⑷冰醋酸液分化至细胞核和颗粒清晰，水稍洗，用风扇吹干。

⑸二甲苯透明，中性树胶封固。

结果：

肥大细胞颗粒红紫色，核蓝色。

染色后用风扇吹干而不用酒精脱水，因酒精容易使肥大细胞颗粒呈蓝色。

硫堇可代替甲苯胺蓝。

醛品红-橙黄G法（改良的Gomori，1950）

试剂：

醛品红液：弹力纤维

橙黄G液：脑垂体

方法：

⑴组织固定于10%甲醛生理盐水溶液，常规脱水包埋切片。

⑵切片脱蜡至80%酒精。

⑶70%酒精稍洗。

⑷入醛品红液染10~15分钟。

⑸70%酒精分色，水速洗。

⑹橙黄G液滴染1秒钟，水速洗。

⑺经各级酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

结果：

肥大细胞颗粒呈紫红色至深紫色；弹性纤维呈深紫色；红细胞鲜橙黄色；其它组织淡黄色。

Gomori醛品红液染弹性纤维和肥大细胞，效果可靠稳定，橙黄G液复染，背景为淡黄色，对比清晰

醛品红液染色胰岛B细胞需30分钟，染脑垂体需1小时，肥大细胞仞需10~15分钟

肥大细胞染色要求组织新鲜，固定声速。

阿利新蓝沙黄法（Csaba,1969)

试剂：

醋酸钠-盐酸缓冲液（pH1.42)

A液（1M醋酸钠）：无水醋酸钠（Sodium acetate anhydrous)8.2克或醋酸钠·3H₂O 13.6克，加蒸馏水至100毫升

B液（1N盐酸）：盐酸（Hydrochloric acid)8.4毫升，加蒸馏水至100毫升

取A液20毫升与B液24毫升混合，加蒸馏水56毫升，其pH1.42。

阿利新蓝沙黄液：阿利新蓝（Alcian blue 8 GX)0.36克，沙黄（Safranin)0.18克，硫酸铁铵（铁明矾Ferric ammonium sulfate)0.48克，醋酸    盐缓冲液（pH1.42)100毫升

方法：

⑴组织固定于10%甲醛生理盐水溶液，常规脱水，包埋，切片。

⑵切片常规脱蜡至水。

⑶阿利新蓝液染色15分钟，自来水速冼。

⑷第三丁醇（叔丁醇Tertiary butyl alcohol)脱水

⑸二甲苯透明，中性树胶封固。

结果：幼稚型肥大细胞颗粒蓝色（生物胺）；成熟型肥大细胞颗粒红色（肝素）。